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主题：【资料】【“仪”起享奥运】快速筛选真菌毒素-- ELISA法和GICA

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发表于：2024/08/05 21:34:07 楼主 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
目前快速筛选法主要包括酶联免疫法（enzyme-linked immunosorbent assay，ELISA）、胶体金标记技术（gold immunochromatography assay，GICA）及生物传感器等。




  ELISA是快速检测和初步定量真菌毒素的重要工具之一，《中国药典》2020年版通则<2351>AF的第3法即为ELISA法。该方法适用于大批量的快速筛选，其特异性强、灵敏度高、成本相对较低，对检测设备要求不高，此外，由于抗体对抗原具有高度的特异性识别，因此样品通常不需要复杂的预处理，并且易于操作。但ELISA的重复性仍需提高，检测结果存在假阳性、不能准确定量。目前已建立了用于不同中药材中AFs检测的ELISA方法，特异性识别AFB1[83-84]或AFB1、B2、G1、G2总量。南铁贵等运用ELISA法对经过液液萃取前处理的麦芽、酸枣仁、桃仁、薏苡仁进行检测，发现AFB1和总量与HPLC法一致。此外，也有采用ELISA法检测薏苡仁中呕吐毒素的报道，检测结果与UHPLC-MS的相关性良好，操作更为简便。基于高通量快检的优势，ELISA法可以从源头环节及时筛查中药中真菌毒素污染情况，常用于定性分析和前期初筛，应用前景良好。

GICA  GICA具有操作简便、快速、稳定性好、成本低、结果直观等优点，适用于现场快速检测。Zhang等采用免疫层析试纸条对AFB1、ZEN、T-2毒素等真菌毒素进行筛选，采用抗体/纳米金颗粒偶联的方法进行了pH、单克隆抗体浓度和抗原量的优化，在检测的30份药品和食品样品中，2份酸枣仁样品呈阳性，经HPLC法和ELISA法验证，检测结果一致，证实该方法可用于药品和食品贮藏场所真菌毒素的快速筛选和同时检测。GICA法已应用于酸枣仁、莲子、薏苡仁、槟榔、决明子和远志等中药材，地龙、决明子、延胡索、土鳖虫、马钱子等中药饮片和牛黄镇惊丸等中成药中，但对真菌毒素残留量的检测多集中于AFB1和AFB1、AFB2、AFG1、AFG2的总量。然而，该方法在检测过程中基质对检测结果影响较大，常出现假阳性和假阴性问题，其次检测结果重复性不高。GICA法对操作人员没有专业技能要求，无需大型仪器设备，可以在短时间内获得测试结果，检测成本较低，适用于现场快速检测大量中药材中的真菌毒素。
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