主题:【求助】还原糖的测定(主要是葡萄糖)

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qiongtao
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各位大哥大姐:
    我在滴定反应残糖的时候,发现颜色变化与实际不一致.本来颜色应该是先有兰色变为紫色,再变为土黄色.但是,当残糖量很小时(一般是<1%以后)颜色变化就看不到土黄色的出现,一直是蓝不蓝,绿不绿,又有点泛黄,即使用标糖反滴也看不到黄色的出现.不知道是什么问题,把我都快急死了.请教个为高手能不能给我指点一二,我的溶液中还含有氯代醇,不知道是不是它对指示剂有影响.
推荐答案:Ω 离子分析回复于2007/12/24
如果有滴定仪,那么自动给出突跃的终点。

如果是手工纪录,那么需要在坐标纸上绘制电位——体积的曲线,再判断终点。
补充答案:

核桃回复于2007/12/20


还原糖的测定方法

过客回复于2007/12/20



有电极能测葡萄糖吗?我看用TOC仪更好点.楼主的滴定方法具体介绍一下来看看.

魔鬼化学人回复于2007/12/24

很简单的滴定呀,在GB/T5009标准下跟着做就可以了,靠近终点要滴得慢,很快会褪色成无色或者微黄透明得

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Ω 离子分析
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象这样颜色变化不明显的,用电极的方式效果更好一些。

可以采用复合铂电极(氧化还原)或金电极。
过客
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原文由 WHO1235 发表:
象这样颜色变化不明显的,用电极的方式效果更好一些。

可以采用复合铂电极(氧化还原)或金电极。


有电极能测葡萄糖吗?我看用TOC仪更好点.楼主的滴定方法具体介绍一下来看看.
核桃
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Ω 离子分析
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原本楼上的反应就是滴定,当然可以用电位的方式了。电极的灵敏度比指示剂高多了。
Ω 离子分析
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【GB/T 5009.7—1985】
一、高锰酸钾滴定法
样品经除去蛋白质后,其中还原糖在碱性环境下将铜盐还原为氧化亚铜,加硫酸铁后,氧化亚铜被氧化为铜盐,以高锰酸钾溶液滴定氧化作用后生成的亚铁盐,根据高锰酸钾消耗量计算氧化亚同含量,再查表得还原糖量。

第二 直接滴定法
 样品经除去蛋白质后,在加热条件下,直接滴定标定过的碱性酒石酸铜液,以次甲基蓝作指示剂,根据样品液消耗体积,计算还原糖量。

这两种都可以使用电位滴定仪测定。一般应该是使用复合铂电极。
qiongtao
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谢谢这位大哥的指点,但是我对电极法不是很了解呀,有没有更详细的啊!呵呵!小弟将不甚感激!
qiongtao
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滴定方法很简单!就是菲林试剂法:
甲液:称取15g硫酸铜(CuSO4•5H2O)及0.05g亚甲基蓝,溶于蒸馏水中并稀释到1000mL。
乙液:称取50g酒石酸钾钠及75g NaOH,溶于蒸馏水中,再加入4g亚铁氰化钾[K4Fe(CN)6],完全溶解后,用蒸馏水稀释到1000mL,贮存于具橡皮塞玻璃瓶中。
0.1%葡萄糖标准溶液:准确称取1.000g经98~100℃干燥至恒重的无水葡萄糖,加蒸馏水溶解后移入1000mL容量瓶中,加入5mL浓HCl(防止微生物生长),用蒸馏水稀释到1000mL。
一、空白滴定
准确吸取费林试剂甲液和乙液各5.00mL,置于250mL锥形瓶中,加蒸馏水10mL。从滴定管滴加约9mL葡萄糖标准溶液,加热使其在2min内沸腾,准确沸腾30s,趁热以每2s 1滴的速度继续滴加葡萄糖标准溶液,直至溶液蓝色刚好褪去为终点。记录消耗葡萄糖标准溶液的总体积。平行操作3次,取其平均值,按下式计算:

式中:F──10mL费林试剂(甲液和乙液各5.00mL)相当于葡萄糖的量,mg;
C──葡萄糖标准溶液的浓度,mg/mL;
V──标定时消耗葡萄糖标准溶液的总体积,mL。
二、、样品糖的定量测定
(1) 样品溶液预测定:吸取费林试剂甲液及乙液各5.00mL,置于250mL锥形瓶中,加蒸馏水10mL,加热使其在2min内沸腾,准确沸腾30s,趁热以先快后慢的速度从滴定管中滴加样品溶液,滴定时要保持溶液呈沸腾状态。待溶液由蓝色变浅时,以每2s 1滴的速度滴定,直至溶液的蓝色刚好褪去为终点。记录样品溶液消耗的体积。
(2) 样品溶液测定:吸取费林试剂甲液及乙液各5.00mL,置于锥形瓶中,加蒸馏水10mL,加玻璃珠3粒,从滴定管中加入比与测试样品溶液消耗的总体积少1mL的样品溶液,加热使其在2min内沸腾,准确沸腾30s,趁热以每2s 1滴的速度继续滴加样液,直至蓝色刚好褪去为终点。记录消耗样品溶液的总体积。平行操作3次,取其平均值。
Ω 离子分析
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如果能够正确滴定出来,用显色剂也可以。
但当干扰严重还是电位滴定的方式更准确一些。

如果有电位滴定仪,那么配上复合氧化还原铂电极直接测定就可以了,滴定溶液还是原来的,非常简单。

如果没有,那么至少需要 单体铂电极+甘汞参比电极(氯化银参比电极)+电位计。手工滴定,一边纪录体积一边纪录电位。
qiongtao
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谢谢这位大哥的指点,但是,在滴定时的终点判断,怎么判断呢?
是不是就看电位突变呀,需不需要先计算一下它的突变范围,或者是化学计量点呀!如果要计算就的知道它们的条件电势,条件电势一般是不知道的,需要自己测,假如就用标准电势计算不知道误差会有多大.
  你们在实验过程中有没有计算过呀,还是就是直接测两,用眼睛看,看到电位变化很快了,就认为到达终点了呀!
  谢谢大哥上次的指点,不过送佛送上西天,希望大哥再帮我一下!呵呵!
Ω 离子分析
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如果有滴定仪,那么自动给出突跃的终点。

如果是手工纪录,那么需要在坐标纸上绘制电位——体积的曲线,再判断终点。
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