检查
溶液外观:在制备和测定过程中溶液温度维持在40℃。取供试品0.5g溶于1M盐酸溶液,用同一溶液稀释至20ml。溶液应澄清(2.2.1)。立即按照紫外-可见分光光度法(2.2.25),于440nm和650nm处测定吸光度。440nm处的吸光度应不超过0.15,650nm处的吸光度应不超过0.10。
还原性物质:取供试品0.10g,用稀盐酸溶解并稀释至25ml。加入0.2ml淀粉溶液和0.25ml 0.01M碘液。静置2分钟。溶液应为蓝色或紫褐色。
有关物质:按
液相色谱法(2.2.29)检验。溶液和流动相应临用新制。
供试品溶液:取供试品50.0mg,用流动相A溶解并稀释至50.0ml。
对照溶液(a):取供试品溶液1.0ml,用流动相A稀释至100.0ml。
对照溶液(b):取3-氨基苯甲酸5.0mg,用流动相A溶解并稀释至100.0ml。取1.0ml,用供试品溶液稀释至25.0ml。
对照溶液(c):取3-氨基苯甲酸5.0mg,用流动相A溶解并稀释至100.0ml。取1.0ml,用流动相A稀释至50.0ml。
对照溶液(d):取3-氨基苯酚10.0mg,用流动相A溶解并稀释至100.0ml。取1.0ml,用流动相A稀释至50.0ml。
对照溶液(e):取2,5-二羟基苯甲酸5.0mg,用流动相A溶解并稀释至100.0ml。取1.0ml,用流动相A稀释至50.0ml。
对照溶液(f):取水杨酸15.0mg,用流动相A溶解并稀释至100.0ml。取1.0ml,用流动相A稀释至50.0ml。
空白溶液:流动相A。
色谱柱:
-尺寸:0.25m×4.6mm
-固定相:色谱级球形碱性去活辛基硅胶(5μm)。
流动相:
-流动相A:取2.2g高氯酸和1.0g磷酸,用水溶解并稀释至1000.0ml。
-流动相B:取1.7g高氯酸和1.0g磷酸,用乙腈溶解并稀释至1000.0ml。
(表格见word文档)
流速:1.25 ml/min。
检测器:分光光度计,检测波长220nm。
进样量:10 μl。
美沙拉秦的保留时间约为5分钟,杂质B的相对保留时间约为0.8,杂质D的相对保留时间约为1.2,杂质G的相对保留时间约为3.1,杂质H的相对保留时间约为3.9。
用对照溶液(b)进行系统适用性试验:
-峰谷比:应不低于1.5。其中Hp为基线上方杂质D色谱峰的高度,Hv为基线上方杂质D色谱峰和美沙拉秦色谱峰之间的曲线上最低点的高度。
限度:
-杂质B:应不超过对照溶液(d)色谱图中主峰的峰面积(0.2%)。
-杂质D:应不超过对照溶液(c)色谱图中主峰的峰面积(0.1%)。
-杂质G:应不超过对照溶液(e)色谱图中主峰的峰面积(0.1%)。
-杂质H:应不超过对照溶液(f)色谱图中主峰的峰面积(0.3%)。
-其它单一杂质:应不超过对照溶液(a)色谱图中主峰峰面积的0.1倍(0.1%)。
-总杂质:应不超过对照溶液(a)色谱图中主峰的峰面积(1.0%)。
-忽略限:为对照溶液(a)色谱图中主峰峰面积的0.05倍(0.05%)。空白溶液色谱图中的色谱峰均忽略不计。
杂质A和杂质C:按
液相色谱法(2.2.29)检验。流动相应临用新制。
供试品溶液:取供试品50.0mg,用流动相A溶解并稀释至50.0ml。
对照溶液(a):取2-氨基苯酚5.0mg,用流动相A溶解并稀释至100.0ml。取10.0ml,用流动相A稀释至100.0ml。
对照溶液(b):取4-氨基苯酚5.0mg,用流动相A溶解并稀释至250.0ml。取1.0ml,加入对照溶液(a)1.0ml,用流动相A稀释至100.0ml。
对照溶液(c):取供试品溶液1.0ml,用流动相A稀释至200.0ml。取5.0ml,加入对照溶液(a)5.0ml。