我是做蛋白质SDS-PAGE电泳的。蛋白质样品用碘乙酸溶液处理后如何除去过量的碘乙酸?
1、取约1 mg的总蛋白样品放入离心管中,加入1ml 6M 的尿素溶液,得到1 mg/mL的蛋白溶液。
2、加入20微升1M的巯基乙醇到上述离心管中,震荡混合5秒钟。
3、将上述离心管恒温在37oC条件下反应1小时 (以还原蛋白中的双硫键)。
4、加入25µL 1M新鲜配制在1M NaOH中的碘乙酸,在避光、室温条件下放置30 分钟。(烷基化将巯基保护起来)
接下来我准备做SDS-PAGE还原电泳,我不清楚样品中的过量碘乙酸对电泳有没有影响?应该怎么除掉?
求高人指点!
![](https://simg.instrument.com.cn/bbs/images/brow/em0808.gif)
![](https://simg.instrument.com.cn/bbs/images/brow/em0808.gif)
![](https://simg.instrument.com.cn/bbs/images/brow/em0808.gif)
![](https://simg.instrument.com.cn/bbs/images/brow/em0808.gif)