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主题：【求助】缓冲溶液怎么配？

浏览0 回复7 电梯直达
njyyyil
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发表于：2010/04/12 15:57:35 楼主 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
①样品的制备
湖水和河水样品中加入浓度为25ng/L的各种喹诺酮抗生素，pH 调至4，在固相萃取前，样品要经过一个0.45μm的微孔滤膜以除去样品中的悬浮杂质。
②固相萃取（SPE）
C18柱（2×1 ml甲醇，1×1 ml纯水，1×1 ml醋酸钠缓冲溶液Ph4）；
水样的pH调至4，然后用大体积取样器离心管取250mL水样渗透过C18柱，然后用3×500μL的pH 4的醋酸钠缓冲溶液（含15%乙腈）洗C18柱，再真空干燥5分钟。然后，取3×1 ml的甲醇溶液（含6%氨）洗分析物，最后，样品提取物用氮蒸干然后溶解在250μL的pH2.5的甲酸中用于HPLC分析。
③液相色谱法
液相色谱分离物用200μL注射剂线性梯度洗脱，如下：从96% A（稀释的甲酸 pH2.5）和4% B（乙腈）到50% A和50% B，在25分钟内，检测波长为275nm。

以上是我的实验步骤，具体想问问：1、在河水中取样后，怎样将水的pH 调至4？
2、pH 4的醋酸钠缓冲溶液怎么配？
3、稀释的甲酸 pH2.5 怎么弄？
4、取3×500μL的pH 4的醋酸钠缓冲溶液（含15%乙腈），这个取法是什么意思？15%是质量分数吗？意思是pH 4的醋酸钠缓冲溶液取3×500μL，在此基础上满足含15%乙腈？是这样吗？
问题有点多，希望好心人耐心讲解下哦！！先谢谢了！
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xky0230699
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2010/4/12 19:50:37 沙发 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
楼主能不能把标准的原文发一份上来？一些试剂标准中应该有说明。
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2010/4/12 23:53:14 Last edit by xky0230699
柏坡
hgycook
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2010/4/12 22:34:59 板凳 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
缓冲液的配置可以参照药典标准，成分比例在这里应该指体积比。
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儒雅凤
liwei7893
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2010/4/13 7:05:19 马扎 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
2、pH 4的醋酸钠缓冲溶液怎么配？
醋酸－醋酸钠缓冲液(pH3.8)　取2mol/L醋酸钠溶液13ml与2mol/L醋酸溶液87ml,加每1ml含铜1mg的硫酸铜溶液0.5ml,再加水稀释至1000ml，即得。
其他缓冲溶液的配置：
附件：
常见缓冲液配制方法.doc
该帖子作者被版主 hgycook加 2积分， 2经验，加分理由：感谢提供参考
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爱杰杰
zhchen1130
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2010/4/13 10:49:45 地毯 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
药典的附录里有各溶液的配制方法，可以按照它来配
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1818
xyhdcm2002
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2010/4/13 14:02:57 地板 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
一般缓冲液附录里都有,如果没有的国标里面肯定有!!
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jiazhi111
jiazhi111
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2010/4/13 20:50:25 6楼 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
我是制药企业，一般按药典附录配溶液缓冲液，没有的按一些试剂手册或国标配。15%乙腈应为体积比。调PH一般在酸度计上调。
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wangweijian666
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2010/4/14 10:34:30 7楼 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
冰醋酸和醋酸钠都是0.2ml的吧
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