主题：【在线讲座33期】液相色谱柱使用疑难问题解析(答疑结束）

原文由 plexu(plexu) 发表:

原文由 wkfei1128(wkfei1128) 发表:
plexu您好！我有以下问题想请教：
1、请问怎么测柱效？柱子填料是SinoChrom ODS-BP 5um ，规格4.6mm*200mm
2、我用苯试了一下，峰性大大好，但是不知道理论塔板数，不知道怎么评价，感觉不大好，对称性不好，有点前延，柱子才用了四个月，是什么原因呢？是不是塌陷了呢？有什么补救的办法吗？
3、流动相里之前有酸的，做完后单纯用乙腈冲洗，能把酸冲洗干净吗？之前他们是这样冲的，现在怀疑柱子塌陷了，会不会是长时间在酸性环境中造成的呢？

测定柱效不同公司不一样，月旭用甲苯，其它公司也有用萘的。一般柱子里面有检测报告，你按照报告里的方法做一遍就可以。
用了四个月峰形拖尾是很正常的，需要维护清洗一下色谱柱以清除引起拖尾的柱头污染。如果柱头塌陷，则不好办，从其它废柱子里取点填料填补塌陷，可以一试，但效果不一定好。色谱柱是耗材，测定进样针数如果达到500以上了，也算是物有所值，物尽其用了，报废了也不可惜。
流动相里有酸，应该先用纯水或80：20的水/乙腈溶剂冲洗吧。如果一直在酸性环境，固定相容易流失，造成保留时间前移和其它色谱性能下降。

原文由 tmh(tmh) 发表:
plexu您好！我有以下问题想请教，
请问：1.我有一根C18的长柱,购来时检测还好,检测完后冲洗保存在乙腈中.但过了几个月再来用时,不管检测什么样品均有前延,按工程师的方法处理过还是不见好.2.是样品过载问题,按药典检测方法检验一些药品有关物质时,都要注入高浓度的供试液,这样往往使得柱过载而峰变形,按老师的方法减小浓度和注入量均是不允许的,怎么处理这问题?

原文由 liuyuan198815(liuyuan198815) 发表:

原文由 plexu(plexu) 发表:

原文由 xue2009(xue2009) 发表:

原文由 liuyuan198815(liuyuan198815) 发表:

原文由 xue2009(xue2009) 发表:

原文由 liuyuan198815(liuyuan198815) 发表:
plexu您好！我有以下问题想请教：
我在用乙腈作流动相时，只要那个乙腈比例稍高一点，比如20%，即使测量波长高于乙腈截止波长比较多，也会产生比较大的溶剂峰，这怎么回事？

我估计不是有机相的问题，而是水相的问题，你水相用的什么缓冲盐？

没用缓冲盐也一样的，我上次用乙腈：水（35：65）作流动相也一样的，检测波长288

用流动相溶解样品，解决你在这个问题

确实如此，如果样品溶剂和流动相溶剂不一致，可能会有溶剂峰出现，有时也会造成峰拖尾。

但规定不是用那个流动相溶解提取样品的，那怎么办呢

原文由 wkfei1128(wkfei1128) 发表:

原文由 plexu(plexu) 发表:

原文由 wkfei1128(wkfei1128) 发表:
plexu您好！我有以下问题想请教：
1、请问怎么测柱效？柱子填料是SinoChrom ODS-BP 5um ，规格4.6mm*200mm
2、我用苯试了一下，峰性大大好，但是不知道理论塔板数，不知道怎么评价，感觉不大好，对称性不好，有点前延，柱子才用了四个月，是什么原因呢？是不是塌陷了呢？有什么补救的办法吗？
3、流动相里之前有酸的，做完后单纯用乙腈冲洗，能把酸冲洗干净吗？之前他们是这样冲的，现在怀疑柱子塌陷了，会不会是长时间在酸性环境中造成的呢？

测定柱效不同公司不一样，月旭用甲苯，其它公司也有用萘的。一般柱子里面有检测报告，你按照报告里的方法做一遍就可以。
用了四个月峰形拖尾是很正常的，需要维护清洗一下色谱柱以清除引起拖尾的柱头污染。如果柱头塌陷，则不好办，从其它废柱子里取点填料填补塌陷，可以一试，但效果不一定好。色谱柱是耗材，测定进样针数如果达到500以上了，也算是物有所值，物尽其用了，报废了也不可惜。
流动相里有酸，应该先用纯水或80：20的水/乙腈溶剂冲洗吧。如果一直在酸性环境，固定相容易流失，造成保留时间前移和其它色谱性能下降。

按照检测报告做了，用的是萘，纯甲醇溶，但是很无语，流动相是甲醇水，出峰时间相对报告提前好多，还出了两个峰，一高一低，在四分多钟，报告里好像是6、7min吧，峰性不好，后来换成乙腈水来测，是一个峰，但是对称性很不好，左边比右边多好多，前拖比较严重，测样时就会发现拖尾了，并且，峰的曲线很不圆滑，有好多类似的拐点，不知道该怎么挽救了。

原文由 wdl158160(wdl158160) 发表:
plexu您好！我有以下问题想请教，
请问
1.保护柱和预柱的作用是不是一样的，如果不一样有什么区别么？
2.保留时间漂移多少为可以接受的范围？

原文由 01041610(01041610) 发表:
plexu您好！我有以下问题想请教，
　我以前做苏丹红用的是安捷伦的SB-C18柱，峰形什么都很好，最近发现4个标样峰后都带有一个小峰，一开始以为是标样问题，后来换XDB-C18后标样又正常了。可是用SB-C18柱做其他用正常，不知怎么回事？还有，像这种C18柱如果压力过高能不能反冲，该如何冲洗？一般做兽残、农残什么的，而且感觉三聚氰胺做后压力更易增高，且容易引发进样器漏等问题，请问做完三聚氰胺需对系统做特殊清洗吗？谢谢

原文由 zxm-1980(zxm-1980) 发表:
plexu您好！我有个问题想请教
1  我是做农药残留分析的，不同的基质杂质含海量是不同的，我用C18分析时有可能一次就污染了，我用高流速，和反向冲洗都解决不了，是不是这根柱子就废了，有没有其他的办法？
2  还有溶剂中的金属过滤头生锈了，会有什么影响？会不会影响到柱子的寿命，金属离子和柱子有没有什么反应？
3  如果在溶剂过滤时把水膜当成有机膜了溶解了而且这样的溶剂又做有机相用了，造成C18柱压由1000升到3000，流动相是乙腈和水，问一下这样的柱子还能用么？有没有什么补救方法？再次感谢！

原文由 jie1ming2(jie1ming2) 发表:
plexu您好！我有以下问题想请教，请问：
近期我们采购了十几根月旭柱子，可否将Ultimate、XtimateT等系列柱子的适用于何种分析，适用于何种流动相？详细解释一下，毕竟刚刚开始试用，还不是特别熟悉柱子的性能。
象cp药典氯霉素、地塞米松磷酸钠、克拉霉素建议用什么柱子？如果流动相含有高氯酸钠建议试用什么系列的柱子？
谢谢。

原文由 qiuzhidelu(qiuzhidelu) 发表:
plexu您好！我有以下问题想请教，
　请问：哪些原因会造成色谱峰变宽、峰高变低，有哪些解决办法？谢谢！