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主题：【求助】内标法具体怎么做

浏览0 回复28 电梯直达
study3322
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发表于：2010/08/08 14:15:45 楼主 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
最近要用内标法检测样品（之前一直用外标法 ，内标法不熟）买了500ug/ml的标准品溶液，还有25mg的内标物，我现在要做内标标准曲线，把500ug/ml的标准品稀释成20ug/ml  ，10ug/ml ，5ug/ml ，1ug/ml四个标准品浓度点做 标准曲线 ，内标物该怎样加，才能让四个浓度的标准品中含有的内标物浓度都是一样的 ，内标物加多少适宜啊 ？
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原天
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2010/8/8 20:21:50 沙发 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
以你曲线的中间的点的浓度为宜;
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study3322
wangdajiu
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2010/8/8 20:33:45 板凳 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
原文由 原天(jianquan69) 发表:
以你曲线的中间的点的浓度为宜;

还有像我这样内标物具体怎样加到标准品中啊？
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原天
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2010/8/8 23:46:27 马扎 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
看你的用多大的容量瓶装你的标准曲线.
25mg的内标定容到100ML就会有250PPM吧.如果你的标准曲线是用50ML容量瓶,那就每个加1mL进去
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zyy4737
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2010/8/9 14:21:57 地毯 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
什么叫内标法啊，我找了很久资料还是看不明白，一直都用外标，

哪位大侠详细点说下，谢谢。
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study3322
wangdajiu
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2010/8/9 18:57:02 地板 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
原文由 原天(jianquan69) 发表:
看你的用多大的容量瓶装你的标准曲线.
25mg的内标定容到100ML就会有250PPM吧.如果你的标准曲线是用50ML容量瓶,那就每个加1mL进去

还有一点请教一下，我的四个标准品浓度是从高浓度逐级稀释下来的，如果加内标是把内标分别加到四个浓度梯度的标准品中，那么我的四个浓度梯度的标准品就不能逐级稀释了啊，那需要单独取高浓度标准品稀释成四个浓度梯度吗？
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原天
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2010/8/10 18:31:23 6楼 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
你这个配标准是不合理的.配标准溶液就不能逐级稀释,三级稀释就是极限.一般有瓶母液,有瓶媒介液.最好就真从母液配出来.
你这样逐级稀释,内标加不进去
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study3322
wangdajiu
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2010/8/10 19:41:49 7楼 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
原文由 原天(jianquan69) 发表:
你这个配标准是不合理的.配标准溶液就不能逐级稀释,三级稀释就是极限.一般有瓶母液,有瓶媒介液.最好就真从母液配出来.
你这样逐级稀释,内标加不进去

好的，学习了，谢谢指点啊
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pingpingzhu
pingpingzhu
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2010/8/10 19:53:31 8楼 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
给你点建议，希望对你有用：
首先看你做的这东西，有没有标准，有标准就参考标准加了。
没有的话，你将你的内标物配成一定浓度的溶液，根据其在仪器里的相应值，来决定你的添加量。你的每个标准溶液的体积应该都是一样的（如1ML），再每个添加相同体积的内标物。内标法的标准曲线是A1/A、A2/A、A3/A.......对应C1、C2、C3.......A1.A2.A3代表你标准物质的在仪器上的峰面积，C1、C2、C3代表各个点浓度，A代表你内标物浓度。
当你你的待测物也要要取1ML样品加相同体积的内标物。
其后就是仪器方法编辑。祝你成功。
该帖子作者被版主 capinter加 4积分， 2经验，加分理由：热心应助
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ghuman
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2010/8/10 20:30:31 9楼 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
学习了，不错
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vsing101
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2010/8/11 22:55:22 10楼 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
25mg的内标定容到100ML就会有250PPM？
这个要怎么算的啊？
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