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液相色谱（LC）

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主题：【求助】菜鸟请教，关于hplc 流动相中加缓冲溶液及请推荐书

浏览0 回复8 电梯直达

mmjing

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发表于：2011/01/23 00:00:50 楼主管理分享倒序浏览只看楼主回复私聊

在做一个新的分析物，看paper 中的流动相， A 是 50uM ammonium acetate（1% TEA）， B 是 90% methanol （1% TEA）。

这 A 应该是缓冲溶液，可是为什么要用 ammonium acetate，为什么用这个浓度，为什么又加 TEA？在什么情况下要加缓冲溶液？我们做的很多别的分析物都直接用 100% H2O for A.

B 里的 90% methanol，那另外的 10%是什么？是10% water 吗？ B里为什么也加 TEA？

很菜鸟。请大家指教。如果能推荐给我关于 HPLC 这方面的比较权威的基础书或者电子书看看，俺非常感激！

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2011/1/24 9:07:35 沙发管理分享倒序浏览只看楼主回复私聊

一般是根据化合物的性质来选的缓冲盐。
加三乙胺一般是为了改善峰形。
10%是水。

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chaoyuewuxian

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2011/1/24 9:10:27 板凳管理分享倒序浏览只看楼主回复私聊

要根据化合物来选择合适的缓冲盐的。浓度可能人家发文章之前也试过其他浓度，现在选的应该是最佳浓度。

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x_m_ch

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2011/1/24 9:11:45 马扎管理分享倒序浏览只看楼主回复私聊

那另外的 10%就是你上面提到的A。
一般情况下是指水相的比例。

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xhwy2010

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2011/1/24 9:43:18 地毯管理分享倒序浏览只看楼主回复私聊

我推荐《实用高效液相色谱法的建立》这本书，我觉得写得非常好。

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gufei10240

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2011/1/24 9:59:49 地板管理分享倒序浏览只看楼主回复私聊

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redrumcha

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2011/1/24 11:52:08 6楼管理分享倒序浏览只看楼主回复私聊

缓冲盐一般是用来控制pH值的，通常就是那几种也不是一定要用这个，方法开发嘛都是实验出来的。实验成功了就用这个了，没试过的也不见得不行，这个就要看经验了。不是任何东西都有确定理论推导过程的。

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llscmary999

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2011/1/24 14:31:17 7楼管理分享倒序浏览只看楼主回复私聊

学习了，，，实验这个东西，要琢磨出一点东西要时间，还要总结，不容易

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flyaway

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2011/2/7 12:34:38 8楼管理分享倒序浏览只看楼主回复私聊

原文由 mmjing(mmjing) 发表:
在做一个新的分析物，看paper 中的流动相， A 是 50uM ammonium acetate（1% TEA）， B 是 90% methanol （1% TEA）。

这 A 应该是缓冲溶液，可是为什么要用 ammonium acetate，为什么用这个浓度，为什么又加 TEA？在什么情况下要加缓冲溶液？我们做的很多别的分析物都直接用 100% H2O for A.

B 里的 90% methanol，那另外的 10%是什么？是10% water 吗？ B里为什么也加 TEA？

很菜鸟。请大家指教。如果能推荐给我关于 HPLC 这方面的比较权威的基础书或者电子书看看，俺非常感激！

B 里面加TFA是为了保持pH，同时保证基线平稳。

这样的方式是很常见的。

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2011/2/7 12:35:19 Last edit by flyaway