主题：关于磷酸盐缓冲液的配制?

原文由 mhsr 发表:
从文献上看到流动相用到磷酸盐(pH7.2),但不知道准确的配制方法,请高手指点一下

磷酸缓冲溶液特性：浓度变化10倍，ph值变化小于0.1。根据这个特性，可以参考网上的磷酸盐缓冲溶液配制方法来配制。
或者配制两份等摩尔浓度的磷酸氢二钾和磷酸二氢钾溶液，边混合边测ph值，直到得到你所需要的。

磷酸盐缓冲液的配制
磷酸盐是生物化学研究中使用最广泛的一种缓冲剂，由于它们是二级解离，有二个pKa 值，所以用它们配制的缓冲液，pH 范围最宽：NaH2PO4： pKa1＝2.12，pKa2＝7.21； Na2HPO4：pKa1＝7.21，pKa2＝12.32
配酸性缓冲液：用NaH2PO4，pH＝1～4，
配中性缓冲液：用混合的两种磷酸盐，pH＝6～8，
配碱性缓冲液：用Na2HPO4，pH＝10～12。
用钾盐比钠盐好，因为低温时钠盐难溶，钾盐易溶，但若配制SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳的缓冲液时，只能用磷酸钠而不能用磷酸钾，因为SDS(十二烷基硫酸钠)会与钾盐生成难溶的十二烷基硫酸钾。
磷酸盐缓冲液的优点为：①容易配制成各种浓度的缓冲液；②适用的pH 范围宽；③pH 受温度的影响小；④缓冲液稀释后pH 变化小，如稀释10倍后pH 的变化小于0.1。
其缺点为：①易与常见的钙Ca2+离子、镁Mg2+离子以及重金属离子缔合生成沉淀；②会抑制某些生物化学过程，如对某些酶的催化作用会产生某种程度的抑制作用.
pH    0.2mol/L NaH2PO4(ml)    0.2mol/L Na2HPO4(ml)
5.7    93.5    6.5
5.8    92.0    8.0
5.9    90.0    10.0
6.0    87.7    12.3
6.1    85.0    15.0
6.2    81.5    18.5
6.3    77.5    22.5
6.4    73.5    26.5
6.5    68.5    31.5
6.6    62.5    37.5
6.7    56.5    43.5
6.8    51.0    49.0
6.9    45.0    55.0
7.0    39.0    61.0
7.1    33.0    67.0
7.2    28.0    72.0
7.3    23.0    67.0
7.4    19.0    81.0
7.5    16.0    84.0
7.6    13.0    87.0
7.7    10.5    89.5
7.8    8.5    91.5
7.9    7.0    93.0
8.0    5.3    94.7




Na2HPO4•2H2O分子量 = 178.05，0.2 mol/L溶液为85.61克/升。
Na2HPO4•2H2O分子量 = 358.22，0.2 mol/L溶液为71.64克/升。
Na2HPO4•2H2O分子量 = 156.03，0.2 mol/L溶液为31.21克/升.

原文由 tyzxmht 发表:
文献的东西不能全信.1,首先是文献的档次问题,我的经验是国标和外文的一般可行,中文的要是核心期刊的有80%的可信度,一般期刊的可信度就很低,也就10-20.
2,看该方法是否也很多文献都提道,条件最一致的情况如何.

文献的东西有些就是做不出来，这个问题值得深思

我的经验是先分别配置好如20mm的磷酸一氢钠和磷酸二氢钠，然后看你需要偏酸性还是碱性，如果是偏酸性多加点磷酸二氢钠，如果是偏碱性多加点磷酸一氢钠即可。

我的经验是先分别配置好如20mm的磷酸一氢钠和磷酸二氢钠，然后看你需要偏酸性还是碱性，如果是偏酸性多加点磷酸二氢钠，如果是偏碱性多加点磷酸一氢钠即可。

我的经验是先分别配置好如20mm的磷酸一氢钠和磷酸二氢钠，然后看你需要偏酸性还是碱性，如果是偏酸性多加点磷酸二氢钠，如果是偏碱性多加点磷酸一氢钠即可。

原文由 huainanwang 发表:
我的经验是先分别配置好如20mm的磷酸一氢钠和磷酸二氢钠，然后看你需要偏酸性还是碱性，如果是偏酸性多加点磷酸二氢钠，如果是偏碱性多加点磷酸一氢钠即可。

日本官方农残检测方法里配磷酸盐缓冲液就是这样配的。

尽信国内标准和文献，不如没有！