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主题：【求助】梯度洗脱时基线下漂是怎么回事？

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minus213
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发表于：2012/04/15 13:31:00 楼主 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
用的安捷伦1100配置VWD检测器。听说有机相的吸收比水相吸收强，基线往上飘，我的怎么是往下漂啊（图1）？我把A换成10%的乙腈后情况一样（图2）。是水的原因还是压力变化引起的？

柱温：40℃；
流速：2.0mL/min；
检测波长：338 nm
流动相：A： 40mM磷酸盐缓冲溶液，pH 7.8；
                B： 乙腈:甲醇:水(45:45:10，V/V/V)。

                                                                        图1


                                                                                  图2

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有水有渝
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2012/4/15 14:57:24 沙发 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
什么色谱柱用这么高的PH，可能是没有平衡好，如果仪器在线混合没有问题的话，先试运行一个空白梯度看看。
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minus213
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2012/4/16 10:36:20 板凳 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
原文由 有水有渝(xky0230699) 发表:
什么色谱柱用这么高的PH，可能是没有平衡好，如果仪器在线混合没有问题的话，先试运行一个空白梯度看看。


用的是安捷伦 ZORBAX Eclipse AAA，作氨基酸用的。我上面的两个图都是空白，柱子已经平衡好了
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pandora98
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2012/4/16 10:54:12 马扎 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
磷酸盐吸收比有机相吸收更强。
基线下降不是问题，重复性好就行
该帖子作者被版主 zhaohua8011加 2积分， 2经验，加分理由：说的不错
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minus213
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2012/4/17 10:09:50 地毯 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
原文由 pandora98(pandora98) 发表:
磷酸盐吸收比有机相吸收更强。
基线下降不是问题，重复性好就行

谢谢啊
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ligang19791117
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2012/4/17 11:00:41 地板 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
图谱虽然不好，但是重复性好，就能说明问题了，不是偶然的是必然的
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xiaowang268
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2012/4/17 16:56:57 6楼 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
重复进样，如果重复性好，那就不是机子问题，是正常的，因为梯度就是这样的，流动相在变化，吸收差值就变化的
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lunanjituan
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2012/4/20 21:33:15 7楼 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
一个通道是盐，另一个接近纯有机相，飘很正常啊
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dudubug
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2012/4/22 2:32:15 9楼 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
又是缓冲盐，又梯度当然漂啊
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tangtang
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2012/4/22 7:49:29 10楼 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
不走梯度的时候会不会漂？
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zhaohua8011
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2012/4/22 15:04:58 11楼 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
如你已经平衡好了漂移估计是温度影响，再则不影响实验的话就无所谓
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