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主题：【分享】民工级琼脂糖电泳上样和照胶TIPs

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发表于：2012/05/05 12:09:12 楼主 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
上样电泳


1.样品中加入loading buffer使其终浓度为1 X，混匀
Loading buffer浓度不宜过低，点样时样品不能很好的沉在胶孔里；不宜过高，电泳时容易形成带形的变形。注意混匀。


2.点样
沿着胶孔的边缘匀速加入。尽量避免碰坏胶孔。枪头不要吸过多的气泡，拔起时不要过猛带出样品。每点一个样完，吸取buffer洗枪头，避免样品混杂。如果是有特殊要求，例如回收，强烈建议每点一个样换一次枪头。加样的速度当然是越快越好，注意保证质量。点样的量不要太大，一方面是体积不要太大，溢出污染邻位样品；一方面两不要太大，容易导致脱尾和模糊不清。


3.接通电源，选择合适的电压和时间电泳。
胶孔与电极成水平状态，防止样品跑歪。跑胶期间不时回来看看，防止样品跑出胶等意外发生。

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2012/5/5 12:09:46 沙发 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
染色成像


1.染色
如果胶中没有加入EB，用0.5ug/ml的EB溶液浸染30分钟。


2.调整镜头的拍摄范围和焦距，成像


3.打印照片做分析记录

注意，重要的结果一定要多照好几张，力求够得上发表级别，数码相机照相又不花钱，胶扔了可就回不来了。这方面我有血的教训啊，一定要注意保存好照片。
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