实战宝典 原创大赛 仪器问答 仪友会 总帖：8092101今日发帖：195 我的社区 签到
快速导航 采购仪器 提醒
凝胶色谱（GPC）
版主:
入住本版
专家:
居民列表

主题：【讨论】水相GPC更换流动相需要多久的平衡时间？

浏览0 回复10 电梯直达
shawnkmchen
头像
结帖率：
100%
关注：0 |粉丝：0
新手级： 新兵
发表于：2012/06/21 09:16:16 楼主 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
我了解到从有机相GPC更换为水相GPC，过程比较复杂，更换之后还需要平衡约一个星期的时间，基线才会平稳。

我现在想请教一下，如果我已经是水相的GPC了，只是要从0.1 M NaNO3更换为0.3 M NaCl的流动相，请问，需要多长时间才能用新的流动相来测试样品呢？
为您推荐
近期热榜
热门活动
您可能想找: 凝胶渗透色谱(GPC)/凝胶色谱 询底价
选参数 看心得 找厂商 查方案
专属顾问快速对接
立即提交
相关阅读
shkh_2008
shkh_2008
结帖率：
100%
关注：0 |粉丝：0
新手级： 新兵
2012/6/21 10:49:07 沙发 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
实验室有GPC在运行，但没有做过。设想一下。可否：

先以0.1 M NaNO3洗柱子，直至基线平稳，然后以一定的梯度过渡，最后100%0.3 M NaCl；

另外一种可能做法：第一种buffer平衡后，直接以第二种buffer，洗柱子。

估计提高流速，过夜，时间应该足够了。

赞贴
0
收藏
0
拍砖
0
举报
tigertooth
tigertooth
结帖率：
100%
关注：0 |粉丝：0
新手级： 新兵
2012/6/21 10:52:48 板凳 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
有机相到水相1天左右就可以换过来了，水相只是盐的种类不同，如果用测试流速走，一晚上足够。
赞贴
0
收藏
0
拍砖
0
举报
小不董
doxw0323
结帖率：
100%
关注：0 |粉丝：0
新手级： 新兵
2012/6/26 12:43:05 马扎 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
不明白楼主为啥要把硝酸钠更换成氯化钠？氯离子对色谱不好的呀，只是盐的切换，比较快的，要不了2小时就应该平衡了，除非你的实验室条件不好，比如温湿不好。
赞贴
0
收藏
0
拍砖
0
举报
小不董
doxw0323
结帖率：
100%
关注：0 |粉丝：0
新手级： 新兵
2012/6/26 12:45:42 地毯 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
有机相和水相的切换时间要长一点，如果是有机相不溶于水需要时间会更长一些，但有机相到水还是比较容易，就算有一点有机溶剂干扰比较小。但是水相岛有机相的时间会更长一些，有水分的话，对有些有机相的分析影响就会很大。
赞贴
0
收藏
0
拍砖
0
举报
shawnkmchen
shawnkmchen
结帖率：
100%
关注：0 |粉丝：0
新手级： 新兵
2012/6/26 16:12:43 地板 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
原文由 tigertooth(tigertooth) 发表:
有机相到水相1天左右就可以换过来了，水相只是盐的种类不同，如果用测试流速走，一晚上足够。

我后来是从0.1 M NaNO3换到了0.1 M phosphate buffer (pH 7.2) + 0.3 M NaCl的流动相。端午节前换好，端午节后过来就可以用了。流速设置为0.1 mL/min，远远低于测试速度1 mL/min。
赞贴
0
收藏
0
拍砖
0
举报
shawnkmchen
shawnkmchen
结帖率：
100%
关注：0 |粉丝：0
新手级： 新兵
2012/6/26 16:17:20 6楼 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
原文由 小不董(doxw0323) 发表:
不明白楼主为啥要把硝酸钠更换成氯化钠？氯离子对色谱不好的呀，只是盐的切换，比较快的，要不了2小时就应该平衡了，除非你的实验室条件不好，比如温湿不好。

从硝酸钠换成氯化钠，是因为在标准样测试报告中，使用的是氯化钠而非硝酸钠。
目前的实验室条件还是很不错的，在以 1 mL/min测试的时候，大约40分钟就可以把所有样品跑出来，是不是在表明1个小时内，溶剂就可以从流动相瓶子流到废液瓶了呢？你说的2个小时平衡时间，是不是说明新的流动相把老的流动相“赶出来”就可以了呢？
赞贴
0
收藏
0
拍砖
0
举报
shawnkmchen
shawnkmchen
结帖率：
100%
关注：0 |粉丝：0
新手级： 新兵
2012/6/26 16:19:09 7楼 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
原文由 小不董(doxw0323) 发表:
不明白楼主为啥要把硝酸钠更换成氯化钠？氯离子对色谱不好的呀，只是盐的切换，比较快的，要不了2小时就应该平衡了，除非你的实验室条件不好，比如温湿不好。

再请问一下，为什么氯离子对色谱不好呀？我发现更换好新的流动相后，柱压由1012 psi增加到了1082psi，会不是是氯离子的影响呢？
赞贴
0
收藏
0
拍砖
0
举报
shawnkmchen
shawnkmchen
结帖率：
100%
关注：0 |粉丝：0
新手级： 新兵
2012/6/26 16:20:46 8楼 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
原文由 小不董(doxw0323) 发表:
有机相和水相的切换时间要长一点，如果是有机相不溶于水需要时间会更长一些，但有机相到水还是比较容易，就算有一点有机溶剂干扰比较小。但是水相岛有机相的时间会更长一些，有水分的话，对有些有机相的分析影响就会很大。

真是非常感谢你的详解。太感动了
赞贴
0
收藏
0
拍砖
0
举报
小不董
doxw0323
结帖率：
100%
关注：0 |粉丝：0
新手级： 新兵
2012/6/27 11:27:45 9楼 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
原文由 shawnkmchen(shawnkmchen) 发表:
原文由 小不董(doxw0323) 发表:
不明白楼主为啥要把硝酸钠更换成氯化钠？氯离子对色谱不好的呀，只是盐的切换，比较快的，要不了2小时就应该平衡了，除非你的实验室条件不好，比如温湿不好。

再请问一下，为什么氯离子对色谱不好呀？我发现更换好新的流动相后，柱压由1012 psi增加到了1082psi，会不是是氯离子的影响呢？

氯离子对不锈钢管道不好，易被腐蚀。你用0.1M的硝酸钠换成0.3M的氯化钠，盐的浓度增大了，压力可能会有变化。
冲洗置换流动相一个是要看你管路中流动相的多少和流速，洗脱体积一般要是整个管路流动相的体积的2-3倍。
赞贴
0
收藏
0
拍砖
0
举报
shawnkmchen
shawnkmchen
结帖率：
100%
关注：0 |粉丝：0
新手级： 新兵
2012/6/27 21:49:08 10楼 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
原文由 小不董(doxw0323) 发表:
原文由 shawnkmchen(shawnkmchen) 发表:
原文由 小不董(doxw0323) 发表:
不明白楼主为啥要把硝酸钠更换成氯化钠？氯离子对色谱不好的呀，只是盐的切换，比较快的，要不了2小时就应该平衡了，除非你的实验室条件不好，比如温湿不好。

再请问一下，为什么氯离子对色谱不好呀？我发现更换好新的流动相后，柱压由1012 psi增加到了1082psi，会不是是氯离子的影响呢？

氯离子对不锈钢管道不好，易被腐蚀。你用0.1M的硝酸钠换成0.3M的氯化钠，盐的浓度增大了，压力可能会有变化。
冲洗置换流动相一个是要看你管路中流动相的多少和流速，洗脱体积一般要是整个管路流动相的体积的2-3倍。

感谢小不董大师的答复，非常的有用！
赞贴
0
收藏
0
拍砖
0
举报
手机版： 水相GPC更换流动相需要多久的平衡时间？
猜你喜欢最新推荐热门推荐更多推荐
头像
高级回复 发表评论
品牌合作伙伴
岛津
日立科学仪器
珀金埃尔默仪器（上海）有限公司（PerkinElmer）
日本电子株式会社
丹纳赫
安捷伦
赛默飞世尔科技
普析通用
欧波同
天美
天瑞仪器
德国耶拿
海能技术
马尔文帕纳科
磐诺科技
上海仪电科仪
梅特勒托利多
聚光科技
莱伯泰科
盛瀚
多宁生物
丹东百特
科哲
卓立汉光
屹尧科技
华谱科仪
宝德仪器
优莱博
HORIBA
布鲁克核磁