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液相色谱（LC）
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主题：我初学液相求教

浏览0 回复15 电梯直达
yiyangxuewu
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发表于：2006/05/06 20:59:00 楼主 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
今天刚学习液相，用的是赛尔泰500二元高压泵，柱子是迪马ODSC-18柱子，梯度洗脱做色素日落黄、柠檬黄，方法是GB/T5009合成色素，外标法标准曲线的过程中发现一开始做得好好的，一个六分钟左右出的峰，一个十分钟左右出的峰，可到后来在进几针练练吧这两个峰都没有出来，而十七分钟出来个一个大大的峰不知道是什么，而且基线在两分钟左右时往下掉掉到电压-50左右，这是怎么回事？并且先出来日落黄、柠檬黄峰的那几张图峰形分离很好就是保留时间每次不一致，这是怎么回事啊？我以为是柱子污染了又用同样的梯度洗脱走了两遍，发现仍然有那个大峰怎么回事?请多多赐教不胜感激!
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2006/5/8 9:07:00 沙发 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
流动相是什么,流量稳定吗
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shgtj
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2006/5/8 9:16:00 板凳 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
我怀疑是你每一针的样品都没有走完带到下一针里了.
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shaweinan
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2006/5/8 9:18:00 马扎 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
　　你进的是对照品还是样品？正常的有几针，它们的保留时间和峰面积的重现性怎样？
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Last edit by shaweinan
独角兽
zhl2005
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2006/5/8 11:41:00 地毯 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
原文由 shgtj 发表:
我怀疑是你每一针的样品都没有走完带到下一针里了.


同样有此怀疑。楼主再检查一下操作过程吧。
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Last edit by zhl2005
zhuwenjie
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2006/5/8 11:52:00 地板 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
个人认为是样品走的时间太短，而后平衡时间不够。
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shaweinan
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2006/5/8 12:01:00 6楼 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
原文由 zhuwenjie 发表:
　　个人认为是样品走的时间太短，而后平衡时间不够。


　　赞同这一说法，建议最好不要用色素进行练习，这一类样品比较伤柱子。
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wjl0220
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2006/5/8 15:48:00 7楼 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
与缓冲盐很有关系，你看看是不是盐的含量过高
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houfeng-8422
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2006/5/8 19:45:00 8楼 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
不知道您的具体方法怎样，很难判断；有可能是柱子的原因，也有可能是流动相的原因，还可能是进样器的原因；有可能是污染，有可能是与流动相或柱子填充物反应，要具体查清原因。
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ting1115a
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2006/5/9 9:26:00 9楼 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
应该是平衡时间太短吧，在你的目标组分出峰后应该多等一会
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shaweinan
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2006/5/10 8:13:00 10楼 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
　　楼主找到问题了吗？
　　用梯度洗脱，在做完一个样品后，如果色谱柱的平衡时间不够，在做下一个样品时，就可能出现开始的色谱峰保留时间的不重现。如果流动相用的试剂质量不好，或者紫外检测器的检测波长比较低，就可能出现基线上漂或下漂的情况。
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