本品为豆科植物决明或小决明的干燥成熟种子。秋季果实成熟采收，晒干，打下种子，除去杂质。

决明子具有清热明目、润肠通便、减肥、抗真菌、降血压降血脂等药物功效。可用于治疗目赤涩痛、羞明多泪、头痛眩晕、目暗不明、肝炎肝硬化、便秘等病症。

样品制备

对照品溶液制备：分别精密称取大黄酚(C15H10O4)对照品、橙黄决明素对照品(C15H10O4)0.75mg、0.5mg于25ml容量瓶中，加无水乙醇-乙酸乙酯(2：1)混合溶液至刻度，摇匀，配制成每30μg/ml含大黄酚、橙黄决明素20μg/ml的混合对照品溶液，备用。

供试品溶液制备：取该药材适量，充分粉碎后过三号筛（药典筛），精密称取过筛后粉末0.5g于具塞锥形瓶中，精密加入甲醇50ml，称定重量，加热回流2小时，放冷，再次称定重量，用甲醇补足减少的重量，摇匀，粗滤纸滤过，精密量取续滤液25ml，蒸干，加稀盐酸30ml，置水浴中加热水解1小时，立即冷却，用三氯甲烷摇床上振摇提取4次，每次30ml，5min，合并三氯甲烷液，加热蒸馏至干，残渣用适量无水乙醇-乙酸乙酯(2：1)混合溶液溶解，后转移至25ml容量瓶中，稀释至刻度，摇匀，0.45um有机相微膜滤过，收集续滤液，待测。

色谱条件

检测器：紫外检测器

色谱柱：C18

流动相：A：乙腈，B：0.1％磷酸溶液

总流速：1.0ml/min

检测波长：284nm

柱温：30℃

进样量：10ul

对照品色谱图：

对照品精密度测试色谱图：

供试品色谱图：

供试品精密度测试色谱图：

供试品定性色谱图：

通过以上色谱图和计算结果我们可以看出该检测具有色谱峰形漂亮，分离度好，精密度高，灵敏度高，检测时间较短等优点。

这个检测有三个地方需要注意：

1.决明子有见过的人应该能发现，它是一种很结实的植物果实，这样的物质里边的有效物质提取出来相对较难，即使是被充分粉碎后。所以提前时每一步工作一定得认真做，做到位，以防万一。

2.这个检测色谱条件如柱温、流速、气泡等一定得控制好，否则可能就会出现定性、定量的不稳定，大家可能也看到了，上面说到的对照品精密度测试有一针有点偏差可能就是这些因素中的某些引起的。

3.这个检测最值得注意的一点是检测前半部分是等度洗脱，后半部分是梯度洗脱，主要是因为后半部分橙黄决明素前有种干扰物（当时定过性，但由于时间较长，忘记什么了）不好分开，所以先用低含量乙腈流动相把大黄酚洗脱出来，再采用梯度洗脱把干扰物和橙黄决明素完全分开。该梯度方式可以做微量调整，但梯度方式是必须的，需特别注意。
该方法检测该样品中大黄酚、橙黄决明素准确、可靠，操作方便、简洁，该方法非常适合该样品中重要药物成分检测，并可作为相关样品检测的参考方法。

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