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毛细管电泳（CE）
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主题：请教不出峰的原因

浏览0 回复21 电梯直达
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芝兰
luqinhua
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2006/12/14 18:46:00 11楼 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
电解的情况几乎是不会出现的，但是随着电泳的进行，电极两端小瓶内的缓冲液组成是会改变的。为了不至于产生太大的焦耳热电流最好控制在50uA以下（左右）。
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quintina
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2006/12/15 8:47:00 12楼 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
怎么这么复杂啊？疯了！
有没有可能是buffer的浓度低了，我用的是10mM的。
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芝兰
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2006/12/15 9:21:00 13楼 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
有可能是buffer 的pH值低了，这会抑制EOF,不知你的pH是多少？
10 mM的乙酸铵浓度还是可以接受的。因为pH值对EOF的影响更大。
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quintina
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2006/12/15 10:07:00 14楼 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
pH已经到了9.8，我觉得应该不低了吧。
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芝兰
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2006/12/15 10:31:00 15楼 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
不出峰的原因有：
1.进样量太小，检测不出，或者根本没进到样。
2.运行时间太短。

解决办法：
1.确认有足够的进样量。
2.用丙酮或其它EOF标记物测定系统的EOF，尽量加大电压，延长运行时间。
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skysnow520
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2006/12/15 11:37:00 16楼 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
有道理.支持.
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quintina
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2006/12/16 15:26:00 17楼 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
buffer种类影响会不会很大？
我换了种buffer，基线改善了，也有吸收响应了，但完全没有峰形。是该继续换buffer种类，还是调节pH值之类的因素？
谢谢！
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芝兰
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2006/12/16 19:04:00 18楼 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
buffer的种类会限制pH等因素的调节，既然有响应了，就先固定buffer,改变其它条件吧。
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xiaojunzhang
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2006/12/17 11:06:00 19楼 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
我觉得是这个原因的．因为我也有过依次，后来也是这样处理成功的
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quintina
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2006/12/18 22:17:00 20楼 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
那我先试试吧，估计够呛，烦......
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