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液相色谱（LC）

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主题：【求助】液相峰分不开，请教！

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wh0151

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发表于：2007/01/04 18:48:00 楼主管理分享倒序浏览只看楼主回复私聊

悬赏金额：20积分状态：已解决

我做的是用液相测取水中的丙烯酰胺，样品是从油条中提取出来的．

agilent1100的，ＵＶ检测器，检测波长：２１０nm.　C18固相萃取柱4.6μmX150cm i.d 5μm

流动相：甲醇：水＝5:95 ; 流速0.5ml/min ; 进样量:10μl ;柱温:40度

出来三个峰分不开，前面一个峰还没出完后面一个峰就跟上了．出峰时间大概在2.5min左右．

试过流动相甲醇：水＝10：90和3：97，峰型差不多，没有改观。

使用梯度洗脱流动相甲醇：水先设20：80，后设5：95，峰型略为分开（仍没分开）且峰型变宽。

实验不知道怎么做了，条件还可以怎么改？望各位大侠指教，谢谢了！

推荐答案：realtiger回复于2007/01/04

梯度洗脱流动相甲醇：水先设80：20，梯度到5：95
另外，可以使用25厘米的柱子

补充答案：

fmwxq回复于2007/01/04

同一上楼的看法，有必要还可以考虑流动相的pH

深海的海豚回复于2007/01/04

过
1. 降低柱温
2. 更换其他色谱柱，可能有改善
3. 使用缓冲盐体系替代水。

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2007/1/4 19:10:00 沙发管理分享倒序浏览只看楼主回复私聊

梯度洗脱流动相甲醇：水先设80：20，梯度到5：95
另外，可以使用25厘米的柱子

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fmwxq

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2007/1/4 21:41:00 板凳管理分享倒序浏览只看楼主回复私聊

同一上楼的看法，有必要还可以考虑流动相的pH

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深海的海豚

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新手级：新兵

2007/1/4 22:52:00 马扎管理分享倒序浏览只看楼主回复私聊

原文由 wh0151 发表:
我做的是用液相测取水中的丙烯酰胺，样品是从油条中提取出来的．

agilent1100的，ＵＶ检测器，检测波长：２１０nm.　C18固相萃取柱4.6μmX150cm i.d 5μm

流动相：甲醇：水＝5:95 ; 流速0.5ml/min ; 进样量:10μl ;柱温:40度

出来三个峰分不开，前面一个峰还没出完后面一个峰就跟上了．出峰时间大概在2.5min左右．

试过流动相甲醇：水＝10：90和3：97，峰型差不多，没有改观。

使用梯度洗脱流动相甲醇：水先设20：80，后设5：95，峰型略为分开（仍没分开）且峰型变宽。

实验不知道怎么做了，条件还可以怎么改？望各位大侠指教，谢谢了！

过
1. 降低柱温
2. 更换其他色谱柱，可能有改善
3. 使用缓冲盐体系替代水。

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