主题：【分享】【我们不一YOUNG】空白实验做不好的问题拆解一二

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发表于：2024/07/09 09:34:52 楼主管理分享倒序浏览只看楼主回复私聊

空白试验测得的结果称为空白试验值。在进行样品分析时所得的值减去空白试验值得到的才是最终分析结果。空白试验是实验室质量控制的重要环节，其准确性对提高检测结果的准确度至关重要。

空白试验值反映了测试仪器的噪声、试剂中的杂质、环境及操作过程中的沾污等因素对样品测定产生的综合影响，直接关系到测定的最终结果的准确性。

空白试验值低，数据离散程度小，分析结果的精度随之提高，它表明分析方法和分析操作者的测试水平较高。当空白试验值偏高时，应全面检查试验用水、试剂、量器和容器的沾污情况、测量仪器的性能及试验环境的状态等，以便尽可能地降低空白试验值。

一、空白色谱柱出峰，求解释？
高效液相色谱，色谱柱是Kromasil C18（15cm*5Um），流动相为10%乙腈和90%三氟乙酸水，走空白色谱柱时在整个保留时间的中间λ置出现较大的色谱峰，走了好几针空白，针的响应都不同，有的很高，有的又很低，但杂峰一直存在，不像是色谱柱里有杂质，用流动相冲洗后依然出现此问题，什么原因？

【原因】
1、确定检测波长，如果是末端吸收，排除三氟乙酸的干扰。
2、使用100%乙腈作为流动相，乙腈作为样品进样，如果为基线，则说明色谱柱及系统完好。
3、然后在换流动相为10%乙腈和90%三氟乙酸水，样品为乙腈，如果有上述“中间λ置出现较大的色谱峰”，那说明八成问题在三氟乙酸上，或者稀释三氟乙酸的水上。
4、如果上述2、3都有“中间λ置出现较大的色谱峰”，检查检测器及进样器。
5、这些还不能解决，请联系工程师。

二、空白乙腈出峰，什么原因？
岛津高效液相色谱仪，进空白乙腈，在样品峰λ出现倒峰，进双蒸水在样品峰出现正峰，进样品时有杂峰干扰，我已经排除了水和乙腈的问题，不知道是不是进样池或者检测器污染了，已经处理了10多天，还是没效果，请指教原因和解决办法。

【分析】
液相中出现倒峰，主要原因是样品吸收比流动相吸收小，所以排除影响，不仅要考虑进样系统污染和检测池污染，还要考虑流动相和色谱柱的影响。换一根柱子试试，考察系统的情况，如果照旧就排除色谱柱的影响，然后更换流动相试试，再然后清洗进样系统和检测池等，或将色谱柱从系统中断开，直接用乙腈或水做流动相清洗检测器就可以知道是否是检测器受污染，如果基线正常，再检查你的进样系统，样品，前处理是否有问题，如果都没问题，就去检查色谱柱。

小结
空白试验是实验室质量控制的重要环节，其准确性对提高检测结果的准确度至关重要。以分光光度法空白为例，要用相应的实验用纯水或有机溶济作参比，不能用空白实验溶液做参比，以免人为减小空白值，从而掩盖空白实验值的变异。
值得注意的是，通过计量认证的实验室，由于检测仪器和玻璃量器定期检定，以及采取了全面的质量管理措施，因此，若测定的空白实验值太大，一般是化学药品纯度不够，配制的试液变质或被污染等原因。应重新配制试液，返工重测该批样品，直至空白实验值合格。