原文由 通标小菜鸟(v3141805) 发表:柱子用的不一样,文献上是WpH C18 column (4.6 mm × 250 mm, 5 μm),我用的是EC-18(4.6 mm × 150 mm, 4 μm),然后液相它用的是HPLC-UV, Dionex U3000, USA,我用的是安捷伦的,浓度我配置了很多都测不出来,其它都是一样的,请问会有影响吗?
柱子的影响在于样品的保留时间,要么一点保留都没有,要么保留很强洗脱不下来,这两种情况可能会造成不出峰。楼主的柱子和文献上一样吗?文献上用的什么柱子,还有仪器参数都一样吗?包括采集紫外波长等。另外楼主配制样品浓度大小也可能是影响出峰的因素之一。
原文由 Ins_8b3bf444(Ins_8b3bf444) 发表: 柱子用的不一样,文献上是WpH C18 column (4.6 mm × 250 mm, 5 μm),我用的是EC-18(4.6 mm × 150 mm, 4 μm),然后液相它用的是HPLC-UV, Dionex U3000, USA,我用的是安捷伦的,浓度我配置了很多都测不出来,其它都是一样的,请问会有影响吗?仪器都一样,文献用的是250mm长柱子,你用的是150mm柱,文献的柱效比你的高,化合物保留强一些,如果文献250mm长柱出峰时间很早,你的短柱就可能没有保留,建议楼主降低流速和柱温试一下看看有没有峰出来。