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主题：【分享】【金秋计划】ABPP技术分析花色苷与蛋白质的共价相互作用—矢车菊素-3-O-葡萄糖苷的活性蛋白质组学

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发表于：2024/09/10 13:48:50 楼主 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
ABPP技术近年来被广泛用于揭示天然活性分子的作用靶标，如黄芩苷、青蒿素、辣椒素及姜黄素等等，利用该技术可以实现对花色苷与蛋白质结合模式的深入探究。首先选择了最优活性的C3G进行修饰，将可点击的炔基引入C3G的A环，再根据此前开发的全合成路线(Org. Lett. 2023,25, 13, 2289–2293)，获得了共价结合探针C3G-Probe和非共价光亲和探针C3G-Diazirine。探针识别靶蛋白后，炔基通过点击化学与荧光染料或生物素连接的叠氮基发生反应。对于非共价分子，需要额外的光亲和基团和紫外光照才能形成稳定的标记。荧光染料直接表征探针的标记，而生物素通过链霉亲和素富集靶蛋白。进一步用胰蛋白酶消化，并通过LC-MS/MS进行鉴定。

花色苷是广泛存在于深色果蔬中的天然活性分子，具有多酚取代的黄酮类结构，其特征为母环的鎓盐氧离子。传统观点往往将其活性作用的分子机制归因于非共价相互作用及对信号通路的影响。然而，这忽略了其鎓盐氧离子骨架的亲电反应性质。实际上，自然界中存在的多种花色苷衍生物，如吡喃花色苷、A型原花青素及二聚体等，都是源于花色苷骨架结构的亲电性而生成。此外，前期文献也报道了花色苷类似结构与氨基酸残基的共价反应，以及结合SO2以实现特异性检测，但却一直缺乏围绕花色苷与蛋白质共价作用的系统性研究。因此，迫切需要彻底阐明花色苷与蛋白质的作用方式，以期指导日常膳食及未来的研究。
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2024/9/12 11:03:36 沙发 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
花色苷与蛋白质有机结合。
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