主题：【第十届原创】关于代号A项目的一次非常奇葩的实验经历

        前不久，用T家UltiMate 3000液相进行A项目有关物质检测，出现一件非常奇怪的现象：样品出峰，而1%自身对照居然不出峰，相同的实验条件和流动相，用A家的1100液相对同一样品重新进样，样品和1%自身对照在相同位置显示有峰，结果分别见图1和表1。

        由于两台液相报告中峰面积单位不一样，将1100的样品（170401-1）峰面积结果换算后结果为

13364.4/60=222.74mAU*min

        这与U3000的结果（225.2626）完全符合，但是样品自身1%对照的峰面积，两家的结果却是天壤之别。问题究竟出自哪里呢？
考虑到可能是样品浓度低，U3000的检测器灵敏度低的原因，于是分别配置一个5%和10%对照，重复以上步骤，结果分别见图2和表2。

表2 样品及自身对照的液相色谱峰面积

表2 样品及自身对照的液相色谱峰图谱

        很明显，U3000所测得的样品与自身对照之间不成线性关系。而表1中1100所测结果明显呈线性关系。

        首先想到的肯定是U3000的检测器有BUG(没办法，因为这些年一直用A家产品，也许是先入为主吧，纯粹个人见解，不掺杂任何品牌歧视哈)。于是将1100和U3000的UV检测器串联，共用U3000的其他模块重新走样，两个检测器得到的结果完全吻合：样品有峰，而1%自身对照无峰。结果意味着问题并非出现在紫外检测器，而是其它模块。依次替代其它模块，逐级排查，最终将问题锁定在泵模块上。
泵上什么部件会导致峰面积的差别如此之大呢？我们知道，液相的自动进样器吸取样品后，是不需要经过泵而直接进入色谱柱分离检测的，而两台仪器所用的流
表2 样品及自身对照的液相色谱峰结果
动相的相同的，样品也是一致的。虽然折腾大半个月得出这个结论，但是从理论上讲，我们都觉得这个结论经不住推敲。没办法，打电话问客服吧……
等了接近一周，工程师终于来了，倒弄了两天，也没有丝毫进展。幸好我们实验室有四台U3000，还是老办法，挨个部件替换，查找原因。我们发现，这四台U3000有两台液相得出的结果与1100结果吻合（如果没有这个发现，我觉得可能到现在我们也找不到问题的原因），于是将另外两台的泵组件挨个替换（过程持续大约一周），终于被我们找到原因：管路过滤器(inline filter)（见图3），对，就是它！就是它！就是它！

        总结一下，前后折腾将近一个月时间，终于找到原因，算是一件幸福的事情吧，虽然工程师和厂家一致认为这两种部件是相同的，没有区别，但是我们的实验结果证明正是这两种部件的差异导致前边的一系列不一致。由于厂家不提供过滤器的材质和工艺（猜测可能处于工艺或者专利保密原因吧），究竟为何这两种规格过滤器会导致前面一系列差别，我们不得而知。很遗憾，我们没有继续跟踪，探究真正原因，也只能猜测可能是由于流动相经过过滤器，性质上发生些微改变，或者过滤器残留一些东西带入流动相，与样品反应，导致以上的结果差异吧。也许这个现象是个例，但是，如果没有发现该问题，项目的进展会出现什么后果呢？所有数据的可靠性会被怀疑吗？
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