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主题：【求助】原梯度分离方法无法分开5种物质，怎样修改梯度分离方法

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发表于：2019/06/13 10:04:57 楼主 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
照搬了文献上梯度分离方法做5种标准样品，结果是完全不能分开出了一个长达7分钟的大峰。用该梯度方法做单个标样，标样都在8.9分钟左右出峰，出峰时间非常接近。想改进这个梯度方法把5种标样完全分离，可是不会改。求高手指导一下怎样改梯度分离方法呀？
原方法  流速0.2ml/min  柱温40度
  时间        流动相甲醇（含0.2%甲酸）的比例      流动相水（含0.2%甲酸）的比例
0.01                            25
5                                40
20                              80
22                              80
22.01                            25
30                                25

文献上色谱柱是shim-pack VP-ODS  （2mm*250mm  i.d.5微米） ，
我实验室只有C18反相柱子（4.6mmi.d.，150mm色谱柱长度，5UM色谱填料粒径）我照搬文献上原方法，结果分离效果非常不理想，如何改进原方法
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hujiangtao
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2019/6/13 10:20:54 沙发 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
普通色谱柱0.2流速有点低
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welewolf
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2019/6/13 21:25:17 板凳 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
先试试增加流速，从0.2逐步升至1
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手机版： 原梯度分离方法无法分开5种物质，怎样修改梯度分离方法
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