主题:【分享】【实战宝典】普通C18柱能否用来分离蛋白质?

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问题描述:现有一个分子量7万左右的蛋白,普通的C18色谱柱(非蛋白专用柱)能否用于分析此样品?

解答:
1)采用分析型C18液相色谱柱分离蛋白质样品时,蛋白质分子量不能太大,否则容易造成色谱柱堵塞,压力增加。

2)采用反相硅胶色谱柱分离蛋白质样品,通常60?的硅胶柱,蛋白质分子量一般最大只能到2000100?的硅胶柱,蛋白质分子量能到5000~7000300?的硅胶柱,蛋白质分子量能到20000~30000;再大分子的蛋白,就不能用反相硅胶柱来分离了。

3)分离分子量较大的蛋白质时,建议使用蛋白质专用柱或使用体积排阻色谱(凝胶色谱,GPC)进行分析。

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