案例分析题:采用以下路线合成3、4、5-三羧酸苯胺。
(合成路线以附件形式上传)
购买了标准品,色谱条件如下:
色谱柱:ODS C18,4.6×250um,5um
检测波长:215nm
流动相:甲醇10+水90+0.5三氟乙酸
问题1:如上进行实验检测购买的标准品,发现主峰A:RT=4min,在RT=12min处有杂质B。按面积归归一法计算,A%=90%,B%=10%。但出厂报告单表明化合物浓度大于99%。请分析原因,并解决此问题,最终得到正确的HPLC结果。
问题2:问题解决完成以后,测试合成产品的质量,发现与对照品一致,纯度很好,于是出具合格单,产品卖出。但客户却反馈回来说明化合物只有90%的含量。请分析原因,并解决此问题,最终得到正确的HPLC结果。
问题3:采用问题1得到的方法进行含量分析,发现结果很好。但是采用亚硝酸或酸碱滴定,发现化合物含量只有90%左右,请分析此产品的纯度好坏,还可以用什么方法来判断此产品的纯度。
问题4:从问题1、2、3,说明HPLC的正确使用?