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紫外可见分光光度计（UV）
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主题：【求助】岛津UV2450光度分析的疑问

浏览0 回复25 电梯直达
llbak
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发表于：2010/04/23 22:17:39 楼主 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
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以前用PE的分光光度计做光度测量时，都是放入空白试剂，先auto zero然后就可以按stard，然后就开始放入样品实验。但是岛津UV2450，却多了个cell blank。不知道cell blank和auto zero有什么不同，做光度测量的时候，该用cell blank 还是auto zero？

还请诸位不吝赐教。感激不尽
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2010/4/23 23:11:27 沙发 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
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ghcily
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2010/4/24 9:07:27 板凳 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
应该是功能上是一样的吧
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llbak
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2010/4/24 10:20:27 马扎 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
to 2L:我用的那台程序是全英文界面。中文版有5个按钮，英文版6个，就是多了个cell blank，我星期一去偷偷截个图来（老板不让那台接U盘怕又中毒）

      安装时工程师是说，cell blank和zuto zero，一个是扫描用的，一个是光度分析用的。
      我问他两个按钮有什么不同，他含糊其辞总之我觉得他在忽悠。安装仪器后他在电脑里装了个PDF文档说明书，但是那文档有版权保护，不能打印不能复制，我还没把这问题搞明白，不知道谁把电脑搞中毒，重装后那份PDF文档就没了。

      后来我有找到2L给的那份文档。觉得很奇怪。我紫外接触不是很多，瓦里安，PE，还有学校用的什么725，好像调零都不用像岛津那样麻烦。比如PE，直接按auto zero，为何岛津要先基线校正，在调波长到500nm？而且只要开机后做一次就OK？如果换不同的比色皿不同的溶剂呢？

    昨天带个人做紫外，在调零这步就搞得不明不白，惭愧死了。
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zhoukoutiandi
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2010/4/25 15:11:57 地毯 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
一样的，cell blank是单个空白，auto zero是空白归零。都是把空白比色皿中的空白吸光度为零，在此基础上再测后面的试剂，做标准曲线。
是一样的。
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micalezhang
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2010/4/26 20:19:32 地板 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
应该是不一样的，cell blank只是针对比色皿，执行这个命令后，之后每次测试样品将会自动减去比色皿本底吸收。auto zero是指我们通常所说的扣除背景比如溶剂的背景，空白背景当然这个时候通常包括了比色皿自己的本底。平时我只要用auto zero就可以了。cell blank有其他用途。
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2010/4/26 20:27:34 6楼 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
另外和你说下，其实每个厂家仪器都有自己特点，所有的命令都是有意义的，因此在我们不知道时，还是不下结论为好。工程师在培训时，我不懂得我就会问他们，他们大多数都会耐心的回答的。做光谱扫描时，是先放空白或溶剂先走基线，然后放入样品就可以进行扫描了。因为基线校正是通俗的说是范围调零。而光度测定模块，我们往往是测定单波长的，所以只要自动调零就好了，但是如果做双波长测定或多波长测定时还是需要做基线校正的。这是基本要求呀！不过以前我也不懂后来慢慢琢磨的啦
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micalezhang
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2010/4/26 20:28:07 7楼 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
希望对你有帮助
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llbak
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2010/4/26 21:08:33 8楼 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
首先感谢各位的回答啊。本来我对归零这个概念不是很清楚，现在了解得比以前深刻了。我今天先查了2005年版的仪器操作规程，里面岛津UV2450，都是使用auto zero 这个键（似乎当时的程序版本没有cell blank）。后来我在本论坛置顶的资料帖子里找到了，之前我说的被病毒搞没掉的说明文档（这里真是牛人多啊），从文档里看到有的程序带有cell blank。有的则没有（见附件）。终于在动力学模块里找到了cell blank的说明（不知道那些没带cell blank的UV PROBE怎么做动力学实验？）：
练习2动力学的基本操作——第 3步 − 进行池空白操作
现在将进行池空白的操作。当点击光度计键条上的池空白时，分光光度计测得一个读数，以后的检测中分光光度计测得的读数都将减去该数。池空白操作的目的在于消除试管对测量结果的影响。一个池空白的测量值在进行新的池空白测量或自动调零前将一直有效。 

最后再次感谢楼上诸位的尽心回答。受益匪浅。这里高手多，本来不好意思写上面那些的，不过还是敲了下去，希望对以后和我同样有此疑问的同行有点帮助。




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llbak
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2010/4/26 21:15:38 9楼 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
原文由 micalezhang(micalezhang) 发表:
另外和你说下，其实每个厂家仪器都有自己特点，所有的命令都是有意义的，因此在我们不知道时，还是不下结论为好。工程师在培训时，我不懂得我就会问他们，他们大多数都会耐心的回答的。做光谱扫描时，是先放空白或溶剂先走基线，然后放入样品就可以进行扫描了。因为基线校正是通俗的说是范围调零。而光度测定模块，我们往往是测定单波长的，所以只要自动调零就好了，但是如果做双波长测定或多波长测定时还是需要做基线校正的。这是基本要求呀！不过以前我也不懂后来慢慢琢磨的啦


学习了，大谢！我以前用PE做多波长的测定，都没做基线校正啊。现在想想有道理，该做的，这个待会我再琢磨学习下。不知道是看书不仔细还是怎么样，在学校学《分析化学》时对基线校正啊调零啊这些概念都是很清楚，一到工作就乱套了。

我们这次碰到的工程师，可能人太多了，大家都问问题，他一个人应不过来，到最后，大家觉得自己想问的都没得到回答。只好自己琢磨那本说明文档，后来没了，有的人就随便按。今天看一同事做多波长的测定，基线校正后cell blank。
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2010/4/27 17:34:17 10楼 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
cell就是比色池（皿），cell blank 就是比色皿的空白校正，只不过其实用不着单独做一个功能按钮，多此一举了。

当比色皿用久了或者表面吸附的物质没有清洗干净，它本身就会产生比较大的吸收，做cell blank扣除这部分。不过实际这时检测的信噪比变差了，会影响线性。一般来讲，个人觉得如果池体本身(空气校零)就产生0.6以上吸光值的话，还是再清洗下或者换个比色皿吧，对高档分光（杂散光指标检测器性能）影响会小些。
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