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主题：【求助】请教：液相 检测样品问题！！

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hanlaoda199
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发表于：2010/08/09 12:22:39 楼主 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
大家帮我看看，我做的类黄酮的HPLC，吸光度很低，不知道这样做出的各化合物的分离度和样品的浓度是否合适，谢谢大家！

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2010/8/9 13:01:07 沙发 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
楼主说明哪几个峰是你要的？已经对各个峰时行定性了吗？
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2010/8/9 14:01:06 板凳 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
吸光度低有很多原因.有的样品吸收度本身就低,有的是因为灯能量低了而造成的表面吸收度低.
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hanlaoda199
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2010/8/10 17:41:30 马扎 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
HPLC做得不多，不是很了解这方面的知识，我用植物叶片提取的，从叶片质量和提取液体积之比来看，浓度已经不小了，可能是物质本身含量比较少，我是根据文献上的方法，在洗脱梯度上又做了调整，可能是这些类黄酮的极性太相似的缘故，峰总是分不开，应该如何富集样品和增大分离度呢？

20-40分钟内出现的几个峰都是我想要的

20-40分钟内的峰，方法学考察肯定要做，我想先按照文献上的方法做好液相条件，再做液质联用，确定了物质之后再买标品进行定量
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有水有渝
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2010/8/11 22:24:36 地毯 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
楼主现在用的什么规格的色谱柱，能不能换一根柱效更好的，文献上的结果是能分离开的吗？
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xue2009
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2010/8/11 23:21:01 地板 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
你这吸光度不低啊，液相纵坐标是毫吸光度啊
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cat186
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2010/8/12 16:28:19 6楼 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
改一下梯度洗脱，换一根长点的柱子，流速相应的提高些再看看
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