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液相色谱（LC）

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主题：【求助】色谱峰变矮变胖了该怎么办？

浏览0 回复23 电梯直达

jy010422

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发表于：2011/03/04 14:29:24 楼主管理分享倒序浏览只看楼主回复私聊

求助~~~~~我的色谱图变得很怪，峰都变胖变矮了，而且不同峰之间的分离度也变差了。上午走的时候还好好的，峰都很尖，中午换另一种流动相跑了一轮，然后刚才再换回原来的流动相，图就变成这样了，。。。请问，为什么会这样？我该怎么做才能让峰型变回回原来的样子呢？谢谢！

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2011/3/4 15:30:42 沙发管理分享倒序浏览只看楼主回复私聊

先测定一下流速是否准确，再看看氘灯的能量值。这两个如果都没问题，应该就是柱子的事了，有可能填料塌陷或其他原因

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glowyouth

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2011/3/4 21:01:36 板凳管理分享倒序浏览只看楼主回复私聊

嘿嘿，这个遇到过！柱效变差了，原因是柱子污染，柱头堵塞，键合变差了！好好冲冲！

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有水有渝

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2011/3/4 22:28:54 马扎管理分享倒序浏览只看楼主回复私聊

色谱柱清洗一下应该就能恢复。

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jy010422

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2011/3/5 2:52:55 地毯管理分享倒序浏览只看楼主回复私聊

原文由 glowyouth(glowyouth) 发表:
嘿嘿，这个遇到过！柱效变差了，原因是柱子污染，柱头堵塞，键合变差了！好好冲冲！

请问，要怎么冲呢？谢谢！！！

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jy010422

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2011/3/5 2:56:40 地板管理分享倒序浏览只看楼主回复私聊

原文由 有水有渝(xky0230699) 发表:
色谱柱清洗一下应该就能恢复。

请问，要怎么洗呢？谢谢！！！

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有水有渝

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2011/3/5 8:20:47 6楼管理分享倒序浏览只看楼主回复私聊

原文由 jy010422(jy010422) 发表:
原文由 有水有渝(xky0230699) 发表:
色谱柱清洗一下应该就能恢复。

请问，要怎么洗呢？谢谢！！！

日常检测完成后怎么清洗的就怎么操作，或者可以看看色谱柱使用说明书有没有清洗方面的介绍，按说明书操作。

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小卢

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2011/3/5 9:34:04 7楼管理分享倒序浏览只看楼主回复私聊

原文由 jy010422(jy010422) 发表:
原文由 有水有渝(xky0230699) 发表:
色谱柱清洗一下应该就能恢复。

请问，要怎么洗呢？谢谢！！！

如果不是十分了解的话，建议：
1.先按照楼上版友的建议依次排查以下问题：
a、流动相污染，是否严格按照规程配比、调ph、过滤等；
b、氘灯，能量下降，但我认为可能行不大，因为你上午还是好的；
c、流路，是否是滤芯、预柱、保护柱等有污染（空走流路看压力是否增大很多）；
d、色谱柱被污染（如果流路压力不高，那么看柱子压力情况，如果增大很多，说明被污染）

2.找到原因后，开始排查，但建议一定要按照以上步骤一步一步排查；
如果怕麻烦也可以一次性把该换的换了、该试的试了，但这样的话对于查找具体原因不利。

3.如果色谱柱被污染不严重，可以建议这样冲洗：
先把流路冲洗干净后，把柱子反向直接连上，但柱后不接检测器，直接到废液，
用90%的甲醇或乙腈（或合适溶剂），以0.2-0.5ml/min的流速冲洗8-12h（过夜即可）。
如果此方法不可行，可以按照说明书上的办法用异丙醇再生（如果无色谱柱厂家工程师指导，建议不要自己做）。

4.以上办法后，柱子还不行的话，一定是被污染太严重，建议报废。

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