主题：【求助】新手，大家帮帮忙分析一下我的图谱。十分感谢

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为什么要用乙腈不用甲醇呢

因为我的检测波长是210nm,乙腈的末端吸收是190nm,而甲醇末端吸收是205nm

那这个色谱条件是比较苛刻的

关于流动相比例问题，只能根据样品特点去调试，在主峰位置，流动相的变化最好缓慢一些

哦，我用70:30跑的时候，样品和对照品是24-28分钟出峰。就推断出来乙腈：水=80:10，乙腈：水=90:10之间出峰，所以我想这次就直接用乙腈：水=80:20开始，至于你说的主峰附近梯度变缓，81:19 走5分钟，82:18走5分钟，83:17走5分钟。。。。。？

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为什么要用乙腈不用甲醇呢

因为我的检测波长是210nm,乙腈的末端吸收是190nm,而甲醇末端吸收是205nm

那这个色谱条件是比较苛刻的

关于流动相比例问题，只能根据样品特点去调试，在主峰位置，流动相的变化最好缓慢一些

哦，我用70:30跑的时候，样品和对照品是24-28分钟出峰。就推断出来乙腈：水=80:10，乙腈：水=90:10之间出峰，所以我想这次就直接用乙腈：水=80:20开始，至于你说的主峰附近梯度变缓，81:19 走5分钟，82:18走5分钟，83:17走5分钟。。。。。？

感觉你的梯度设置的还是很多的，不是你这样的，一般先是等度一段时间，在慢慢上升，平稳一段时间，最后大比例冲柱子，再平衡的

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感觉你的梯度设置的还是很多的，不是你这样的，一般先是等度一段时间，在慢慢上升，平稳一段时间，最后大比例冲柱子，再平衡的

原文由 houjjun(houjjun) 发表:
这个主要就是波长，流动相和梯度，一个个找找原因吧

因为对照品的最大吸收波长是210nm,220nm以后就吸光度就很小了。流动相发觉加了甲醇分离的更不好，两个对照品保留时间相差不大。梯度不知道怎么设置

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这个主要就是波长，流动相和梯度，一个个找找原因吧

因为对照品的最大吸收波长是210nm,220nm以后就吸光度就很小了。流动相发觉加了甲醇分离的更不好，两个对照品保留时间相差不大。梯度不知道怎么设置

梯度可以先设个线性的，如0－30分钟，A相从0－80％，看看情况，后再细分