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液相色谱（LC）

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主题：【已应助】基线噪声

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发表于：2024/08/16 12:15:01 楼主管理分享倒序浏览只看楼主回复私聊

噪声特别大，基线也跑不平，一直向下漂移

推荐答案：JOE HUI回复于2024/08/16

楼主，出故障原因:首先检查泵压是否稳定。若泵压不稳，单向阀内可能有异物或气泡；预柱、色谱柱、手动进样器、在线过滤片或者管路堵塞。

解决方法:将单向阀拆下用超声波清洗，根据样品分析时使用的不同流动相(如有机溶剂、无机溶剂、含盐溶剂)，可以判断选择清洗液。清洗完单向阀并重新装上后，为防止在单向阀内产生气泡，可以先用甲醇做流动相赶一下气泡，再根据分析时使用的不同流动相选择不同的置换液(注意:在置换甲醇时不要把气泡带入管路中)；更换色谱柱或者用阻尼管代替色谱柱，看压力有无变化，判断色谱柱是否堵塞。另外判断其他部分是否堵塞，可以通过用一段外接管路将其短路连接的方法，观察短接后泵压力的变化，判断手动进样器、预柱等是否堵塞(用缓冲盐做流动相时，因盐分会在管路中析出，在使用前和使用后都要用纯水清洗流路，绝对禁止将缓冲溶液留在流路中静置过夜或更长时间)。检查完成后，泵的原因即可排除。

其次检查流动相内是否有杂质。在停泵或者使用空气池(将流通池内的镜片和池垫片拆下，流通池内充满干燥的空气)时观察基线变化，若基线稳定，则说明流动相中有杂质(或者是因为氘灯能量不稳定造成的，后面会讲到)。流动相溶剂应选择HPLC的溶剂或以此为标准的溶剂，流动相使用前用0.45μm滤膜过滤、脱气，清除微粒和灰尘。检查流动相和流路，排查原因后，去除流动相内的杂质。

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2024/8/16 14:18:10 沙发管理分享倒序浏览只看楼主回复私聊

流动相不均匀：流动相条件的变化可能引起基线漂移。使用HPLC级的溶剂和高纯度的盐和添加剂，并在使用前对流动相进行脱气处理，可以减少这种影响。
检测器出口阻塞：高压可能造成流通池窗口破裂，产生噪音基线。检查并清除阻塞物或更换管子，参考检测器手册更换流通池窗。
样品中有强保留物质：这可能导致基线逐步升高。使用保护柱，并定期用强溶剂冲洗色谱柱，以减少这种影响。
流动相混合不完全：这可能导致基线噪音。可以通过摇动混合均匀或使用低粘度溶剂来解决。
系统内有气泡：气泡可能会影响基线的稳定性。使用强极性溶剂清洗系统，并在检测器后面安装背景压力调节器，以减少气泡的影响。
检测器灯能量不足：更换检测器灯可以解决由此引起的基线噪声问题。
色谱柱填料流失或阻塞

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