主题：【分享】【金秋计划】菌种退化的原因分析、预防措施及其复壮技术

菌种在传代过程中，由于遗传物质变异导致原有的优良性状渐渐消失或改变，会出现长势差、质量不好、菌落丛生等现象，这些现象被视为“退化”。需要注意的是，退化和老化是两个截然不同的概念。退化是会传给子代，而老化现象不会传给子代，这是与退化的最大区别。因此，一旦菌株出现异常，首先要搞清楚是老化还是退化。
（1）菌种退化的主要原因。
①基因突变和遗传原因。
菌种退化主要与细胞变异密切相关。当菌种遗传物质发生变异后，突变体往往更能适应外界环境，变异的细胞再分裂，变异体将会越来越多。
②生理代谢原因。
由于培养成分配比不当、培养环境不适宜等，影响菌种的生理代谢，导致菌种退化。
③保藏方式不当或长期保藏。
目前公认的防止菌种退化的最好保藏方式是采用液氮超低温保藏。而一般的保藏方法，菌株处于休眠状态，但并未完全停止其生命活动，仍然存在变异的风险。
④菌种混杂。
在菌种继代培养过程中，可能出现不同品种间交叉感染情况，造成原有菌种生产性状发生改变，出现退化现象。
⑤宿主感受态老化。
对于工程菌来说，菌种退化是一个无法回避的问题。究其原因，大多数是由于宿主感受态自身发生退化引起的。
（2）菌种退化的预防措施。
① 定期分离纯化菌种。
在菌种培养中，为了保证菌种质量，每隔1至2年，必须对原菌种进行分离纯化。菌种纯化是常用的一种复壮方法。
②控制菌种传代次数。
由于菌种退化和传代次数密切相关，因此，应控制菌种传代次数，一般情况下，代数不能超过5代。
③采取适宜的保藏方法。
最好建议采用液氮超低温保藏方法，并使用保护剂，如甘油、二甲基亚矾、糊精、吐温80等进行保护处理。
④菌丝尖端分离。
挑取健壮菌丝体顶端部分进行纯化培养，以保持菌种的纯度，使菌种恢复原来的生活力和优良种性，达到复壮的目的。
⑤适当更换培养基。
长期在同一培养基上继代培养的菌种，活力可能逐渐下降。因此，在菌种保藏传代中，可以适当改变培养基成分，或在原有的培养基中添加酵母膏、麦芽汁、氨基酸类和维生素等营养成分，提高菌种活力。
⑥更新原始宿主菌。
当工程菌出现菌种退化后，需要及时更换原始宿主菌，并更新其相应感受态，再转化保种。
（3）复壮技术。
复壮技术主要步骤包括菌株活化、初筛、复筛3个步骤。