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液相色谱（LC）
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主题：【分享】液相色谱中流动相的选择原则

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发表于：2024/09/08 20:20:46 楼主 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
1.尽量选择毒性小的溶剂，我们应该了解常用试剂的MSDS，尤其了解其毒性以及如何处理突发情况。

2.然后我们选的溶剂之间是相互互溶的。

3.与检测器匹配：紫外：流动相的截止波长要低于样品的检测波长；RI：流动相的折光系数与样品的差异较大；ELSD：挥发性或受热分解成气体的流动相；质谱：能促进相应离子源模式下化合物的电离。

4.粘度低：高粘度溶剂会影响传质和扩散，降低柱效，柱压会高。

5.流动相pH：反相模式下，对于可电离的化合物，应调节流动相pH使待测物不电离，处于分子状态。一般酸性分析物使用流动相pH比分析物酸度系数更低的流动相，碱性分析物使用流动相pH比分析物酸度系数更高的流动相。                                                                                                                                                                                                                                                                                                6.流动相中的缓冲盐：应考虑缓冲盐在有机相中的溶解度，一般运行梯度不会超过70%有机相，防止泵头处盐析，应考虑将B相配制成有机相与水混合溶液。

7.离子对试剂能不用尽量不用，如果用的话，尽量专柱专用，因为离子对会使色谱柱填料改性。

8.流动相的纯度，HPLC用色谱纯有机相，水用二次纯水或屈臣氏蒸馏水，质谱需用质谱纯的有机相和水。

9.不能对色谱系统造成损坏，比如二氯甲烷会腐蚀泵的金属组件，可与其他试剂预混后使用，用完要及时置换系统；碱性流动相会对普通色谱柱的硅胶溶解塌陷，有机杂化的硅胶对碱性环境的稳定性更好一些。

10.不对样品造成破坏。




另外对于制备色谱的流动性有两点补充：

1.对样品有一定的溶解性，如果对样品的溶解性差，会导致样品析出，会影响分离，甚至堵塞进样器或色谱柱。

2.挥发性好、沸点低，利于分离后的馏分后处理。
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