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主题：【第十七届原创】酶重量法测定食品膳食纤维的操作要点

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小电子发表于：2024/10/09 18:28:31 楼主 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
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首先，我们要明确实验的目的和原理。酶重量法主要是通过酶解去除样品中的蛋白质和淀粉等非纤维成分，然后通过称重来计算膳食纤维的含量。简单来说，就是通过酶的作用，把膳食纤维从食品中分离出来，再称重量。

接下来，是样品的制备。取约1克的样品，加入75%的乙醇中，振荡30分钟，然后离心15分钟，弃去上清液。这个步骤需要重复一次，确保样品中的可溶性糖分和其他非纤维物质被充分去除。晾干沉淀后，我们就可以进行下一步了。

然后，是酶解处理。这一步很关键，我们要加入纤维素酶和皮二糖酶，让它们在适宜的温度和pH值下发挥作用，分解样品中的非纤维成分。具体来说，先将样品沉淀加入含有纤维素酶和醋酸钠的烧杯中，搅拌均匀，在室温下放置20分钟。之后，再加入皮二糖酶，继续搅拌均匀，室温下放置至少2小时。

酶解完成后，我们就要进行沉淀分离了。将酶解后的样品倒入锥形瓶中，上层液为可溶性纤维，下层沉淀为不可溶性纤维。这里要注意，一定要确保分离彻底，避免可溶性纤维和不可溶性纤维的交叉污染。

最后，是干燥称重。将分离得到的不可溶性纤维沉淀放入钛纸中，进行干燥，直至恒重。然后，称重得到不可溶性纤维含量。总膳食纤维含量则是不可溶性纤维与可溶性纤维含量之和。

在整个实验过程中，有几个注意事项需要特别关注。首先是样品的重复性，确保每次操作的平行性，以提高结果的准确性。其次是可溶性纤维的完全沉淀，避免其在干燥过程中损失。此外，酶解过程中的温度和时间的控制也非常关键，它们会直接影响实验结果。
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