ellery回复于2009/04/25
请教,你说的意思是用药物的标准品作为调谐液来用,进行质谱条件优化吗?
宁馨儿回复于2009/05/08
300uL/min应该是30uL/min还有点靠谱哦,一般负离子要求在e6,正离子要求在e7是规程上写的很清楚的啊。
恩,是30uL/mL
lrm回复于2009/05/12
300uL/min是指LC流速,针泵一般为10-20uL/min
happy_horse1126回复于2009/06/08
ABI的质谱也是推荐使用流动相做方法优化的,但实际操作中,我们往往不用。因为这样就把针泵中的样品稀释了。不过用三通即走流动相又走针泵是最贴近实验实际条件的,这种方法才是最实际的优化方式。只是我们实际做下来发现走不走流动相调谐出的结果都差不多,所以我们通常就不用三通走流动相了。至于流动相的比例,因为现在质谱流动相通常是要走梯度的,这样就中庸一下,选甲醇(或者乙腈):水=50%了。如果你是走等度的流动相,可以用你以后分析时的流动相做调谐。
原文由 juju11 发表:
优化质谱条件,一般先用蠕动泵优化,溶剂不一定,看样品的性质选择合适的溶剂。
然后接上柱子优化色谱条件,等流动相基本定下来后,再接上三通,继续优化参数,如源温和气的参数等。
质谱响应大小,和化合物的性质很有关系的。不一定浓度高了,就能达到e7。
至于系统压力,不过使用蠕动泵,好像看不到系统压力的吧,如果接三通,不接柱子,压力不会太高的,具体多少也不一定,这个和管路长短、内径、使用的流动相组成等很有关系。
原文由 lrm 发表:
我们做药物方法开发的一般步骤是:首先配置1ug/ml或1PPM的50%MeOH/H2O溶液(若药物极性较小,可加大有机相的比例),结上三通,即连接LC和针泵,一般流速300ul/min,TSQ上一般母离子信号在e5-e6比较正常,达到e7说明此化合物信号比较高(只有在仪器校正时会要求母离子信号e7),然后待母离子信号稳定后,确定子离子,按步优化质谱参数(Tublens,CE等);SRM,质谱参数确定后卸掉三通,连接LC,最后优化LC条件(一般进样20ng/ml左右的样品溶液)。
原文由 zhufangwei 发表:原文由 lrm 发表:
我们做药物方法开发的一般步骤是:首先配置1ug/mL或1PPM的50%MeOH/H2O溶液(若药物极性较小,可加大有机相的比例),结上三通,即连接LC和针泵,一般流速300uL/min,TSQ上一般母离子信号在e5-e6比较正常,达到e7说明此化合物信号比较高(只有在仪器校正时会要求母离子信号e7),然后待母离子信号稳定后,确定子离子,按步优化质谱参数(Tublens,CE等);SRM,质谱参数确定后卸掉三通,连接LC,最后优化LC条件(一般进样20ng/mL左右的样品溶液)。
300uL/min应该是30uL/min还有点靠谱哦,一般负离子要求在e6,正离子要求在e7是规程上写的很清楚的啊。