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液相色谱（LC）
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主题：【原创】对调节流动相PH值的认识误区

浏览0 回复9 电梯直达
fobhcff
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发表于：2010/10/01 15:31:12 楼主 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
刚开始接触色谱，要求调节流动相PH值，还以为是必做的流程，相信刚接触的你也是这么认为的，但这种认识是错误的，
1、这样的要求只是为了统一，便于保护柱子。
2、每个色谱柱都有其特定的PH使用范围，不在此范围会影响到柱子的使用寿命，和柱子的稳定性。
3、你调了PH值，必然会用到酸或碱带入新的杂质，得不偿失。
4、如果你用超纯水的话，配出来的流动相一般会保持在某一个范围内，没有必要调。
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2010/10/1 22:49:15 沙发 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
大多数调节流动相是由于物质分离的需要，只是你还没有遇上不调ＰＨ就做不出来的物质，或重现性差，峰形不好的情况。当然也不是说所有的流动相都要求调ＰＨ，决定与你所检测的物质，只使用甲醇或乙腈-水的流动相也很常见，没有要求调节ＰＨ或加入缓冲盐，离子对等。
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naranjo
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2010/10/1 23:39:14 板凳 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
一般的液相检测也许流动相不调pH问题不大，在做指纹图谱时就要寻找适合的pH，离子色谱、离子对色谱中pH对分离效果有很大影响。
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青林
wyqql2060
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2010/10/2 8:10:57 马扎 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
一般做验证的时候PH范围是10%,所以楼主的提议有一定意义
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幽灵龙猫
xiaodu2007693
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2010/10/2 13:01:31 地毯 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
主要是根据待分析样品的性质
如果是中性，不用调pH
酸性的，加酸；碱性的，加碱
范围要在色谱柱耐受范围之内，且用完要好好冲洗
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〓猪哥哥〓
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2010/10/3 19:05:38 地板 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
调PH在液相过程中比较常见。
分析单一样品如果比例合适，可能用不上酸碱，但分析多种成分时，不加酸碱，峰型和出峰时间，分离度就达不到要求
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头像更新中，请稍候…
kaikaifeng
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2010/10/4 21:57:32 6楼 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
一般情况下都不用调的~
除非对一些比较特殊的样品~
或者，不调PH做不出来的情况~
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无为
taodali
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2010/10/5 23:17:00 7楼 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
对于缓冲盐类的流动相，调PH也是为了能使其落在一个稳定的缓冲区呀！
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work037
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2010/10/6 16:58:11 8楼 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
现在由于柱子的性能越来越好了，所以缓冲盐体系用的少，但一般来说调pH后系统的重现性会好很多。
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pandora98
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2010/10/6 17:11:27 9楼 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
原文由 fobhcff(fobhcff) 发表:
刚开始接触色谱，要求调节流动相PH值，还以为是必做的流程，相信刚接触的你也是这么认为的，但这种认识是错误的，
1、这样的要求只是为了统一，便于保护柱子。
2、每个色谱柱都有其特定的PH使用范围，不在此范围会影响到柱子的使用寿命，和柱子的稳定性。
3、你调了PH值，必然会用到酸或碱带入新的杂质，得不偿失。
4、如果你用超纯水的话，配出来的流动相一般会保持在某一个范围内，没有必要调。


色谱柱填料基质是硅胶，无论如何封端，都会有大量残留的硅羟基，这些硅羟基的pka大概在4～5左右（见过很多中说法，但是多数都在这个范围），所以，为了抑制硅羟基导致的峰形差、拖尾，一般我们使用的流动相首选添加0.1％的磷酸或者是三氟乙酸（pH大概在2.2左右）。
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