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主题：【原创】食品中氨基酸分析方法（HPLC法）简述

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qingqingcao
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发表于：2011/05/24 23:10:12 楼主 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
我以前搞过段时间食品中氨基酸分析，以下是一点自己的笔记。供参考。由于涉及到了一些公司的内容。所以，我不敢透露更具体的。理解。

主要样品：含脂肪的肉汤，肉块等。

氨基酸分析测试室使用安捷伦1100系列HPLC仪器，通过柱前衍生法分析氨基酸。我司提供食品，保健品，饲料等游离和水解氨基酸含量测试。

仪器配置和原理：

四元泵梯度切换——自动进样器——柱——紫外检测器——记录仪

自动进样器是通过吸取OPA（邻苯二醛）和FMOC-Cl加入样品和标准品中，使样品和标准品中的氨基酸接上荧光基团，在分析柱中分离，后用荧光检测器检测。荧光法检测精度高，检测限低。

样品前处理原理和操做步骤：

游离氨基酸前处理

原理：通过使用三氯乙酸溶液作为蛋白质变性剂，沉淀蛋白质，而不破坏溶液中氨基酸。

与公司前处理比较：公司使用热水浴提取固体或液体样品。该方法不能有效地去处样品中（汤，肉等）蛋白质，致使样品中蛋白质悬浮于样品中，污染色谱柱，仪器。由于样品处理简单，对于复杂样品可能提取效率稍差。

大致操作步骤：

称样——10%三氯乙酸定容——放置——滤过——离心

方法优点：能有效去处蛋白质，而不破坏样品中氨基酸。

水解氨基酸

原理：分析蛋白质或多肽氨基酸组成，需将各肽键裂解为游离氨基酸。一般使用强酸或强碱。本次学习是使用6mol/L盐酸消解，提取。


操作步骤：

称样于消解管——加盐酸——抽真空——封口——烘箱消解——定容——蒸干——加水溶解——离心——上样分析
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2011/5/25 0:12:40 沙发 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
请专家介绍一下饲料的检测，我们下个月准备做
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qingqingcao
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2011/5/25 14:33:53 板凳 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
快乐，你可难为我了。我已经4年没做氨基酸测试了。忘都忘了。也感谢你对我的信任。
你是用日立牌氨基酸分析仪吗？
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2011/5/25 15:21:02 马扎 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
原文由 qingqingcao(qingqingcao) 发表:
快乐，你可难为我了。我已经4年没做氨基酸测试了。忘都忘了。也感谢你对我的信任。
你是用日立牌氨基酸分析仪吗？


日立的氨基酸分析仪我们有，但是时间长了，柱子等部件老出问题，现在，领导要求我用UPLC来做，所以很想知道一些方法。
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qingqingcao
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2011/5/27 14:26:39 地毯 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
是需要 液相条件还是前处理方法？
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快乐
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2011/5/27 15:03:06 地板 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
原文由 qingqingcao(qingqingcao) 发表:
是需要 液相条件还是前处理方法？


主要是前处理。
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2011/6/7 13:34:44 6楼 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
原文由 快乐(ynsfeed) 发表:
原文由 qingqingcao(qingqingcao) 发表:
快乐，你可难为我了。我已经4年没做氨基酸测试了。忘都忘了。也感谢你对我的信任。
你是用日立牌氨基酸分析仪吗？


日立的氨基酸分析仪我们有，但是时间长了，柱子等部件老出问题，现在，领导要求我用UPLC来做，所以很想知道一些方法。


您这个时间长了是什么意思？说说具体的出了哪些问题？有问题找维修工程师啊，用UPLC来说，柱子成本非常高，饲料样本比注射剂的要脏多了，样品处理时多留意吧。
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qingqingcao
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2011/6/8 12:26:46 7楼 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
原文由 快乐(ynsfeed) 发表:
原文由 qingqingcao(qingqingcao) 发表:
是需要 液相条件还是前处理方法？


主要是前处理。


前处理，我应该写得很清楚了。不过也可以打电话给江南大学 分析测试中心，问问里面一位专家。
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zhangdp
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2011/6/27 9:47:57 8楼 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
我想问方法的质量控制
酸水解，再用液相做氨基酸，因为步骤较多，如何控制方法的准确度？加不加回收率指示物，或者内标啥的，有没有鱼肉的氨基酸标准品可供使用。
谢谢
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zhangdp
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2011/6/27 10:06:10 9楼 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
几个国标里都没提到回收率的事项，或者质量控制
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2011/6/27 13:22:40 10楼 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
原文由 zhangdp(zhangdp) 发表:
几个国标里都没提到回收率的事项，或者质量控制


回收率是看检测过程的准确性，国标里没有提，但在实际检测过程中，一定要做的，就如方法验证一样。
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