紫外可见分光光度计(UV)

主题:【求助】求助帮忙解释一下这个奇怪的紫外实验现象,多谢!!!

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grexx213
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A和B之间有络合,A有吸收,B没有。

配置A浓度固定,B浓度逐渐增加的系列溶液,然后上UV-VIS。

从文献上看,混合后应该A的吸光度变小,表明在B的作用下A的形态发生了变化。

但是我们的实验里,发现直接加入B以后测量,UV的吸光度变大。

如果此时把溶液过滤一下再测,吸光度又较A小。


而且继续增加B的浓度,过滤前吸光度继续变大,过滤后更加小。


事实上到了一定浓度,过滤以后基本上没有吸收了。


我现在怀疑是形成了络合物析出来了,但是因为是稀溶液,A的浓度是30 nM,对着光也不敢肯定那些悬浮的是灰尘还是络合物。


所以如果有光谱高手麻烦解释下这个现象,多谢。


btw,测CD的时候没有过滤,直接测,增加B的浓度,吸光系数一直是减小的。这又是为什么?
该帖子作者被版主 mengzhaocheng3积分, 2经验,加分理由:谢谢在紫外可见板块发表有价值的讨论话题。
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tutm
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从实验图看,有几点是应该可以确定的:
1. A+B的生成物应该能提高260nm处的吸光度;并且能降低240nm以下的吸光度,这可能是B加入时,溶液有所稀释?

2. 过滤后260nm处吸光度下降了,楼主的想法应该是可以的,这是常见的;但是240nm以下却上升了,这有点不好解释了。

btw,所说的是什么意思啊?CD是另外的物质?
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grexx213
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呃,溶液里A的浓度没变,加入B以后是要定容的。

btw是by the way的缩写  :)

CD是圆二色谱。

原文由 tutm(tutm) 发表:
从实验图看,有几点是应该可以确定的:
1. A+B的生成物应该能提高260nm处的吸光度;并且能降低240nm以下的吸光度,这可能是B加入时,溶液有所稀释?

2. 过滤后260nm处吸光度下降了,楼主的想法应该是可以的,这是常见的;但是240nm以下却上升了,这有点不好解释了。

btw,所说的是什么意思啊?CD是另外的物质?
tutm
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哦,是圆二色光谱啊,我还以为是ABCD四个物质。
用CD测到的吸光系数还与样品的旋光性有关,这样倒是可能部分排除了你生成的络合物影响,因此与你前面过滤后的结果趋势一致了
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2012/3/10 12:53:15 Last edit by tutm
grexx213
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呃,请问一下,“部分排除了你生成的络合物影响 ”是什么意思,生成络合物就没CD信号了?

原文由 tutm(tutm) 发表:
哦,是圆二色光谱啊,我还以为是ABCD四个物质。
用CD测到的吸光系数还与样品的旋光性有关,这样倒是可能部分排除了你生成的络合物影响,因此与你前面过滤后的结果趋势一致了
tutm
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原文由 grexx213(grexx213) 发表:
呃,请问一下,“部分排除了你生成的络合物影响 ”是什么意思,生成络合物就没CD信号了?

原文由 tutm(tutm) 发表:
哦,是圆二色光谱啊,我还以为是ABCD四个物质。
用CD测到的吸光系数还与样品的旋光性有关,这样倒是可能部分排除了你生成的络合物影响,因此与你前面过滤后的结果趋势一致了

CD测试不熟悉。
我的意思是,CD测到的是某一旋光角度的吸光系数吧,生成的络合物也许没有旋光性了,比如形成的是你能过滤掉的微小颗粒,或者是形成具有类似内消旋性的聚集体了,由此对你测试A物质的CD没有明显的影响了
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