主题:【求助】内标法到底如何操作

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liangting
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论坛里好多内标法的帖子,看了,但是不明白到底如何操作。第一,每次做样非要测定质量吗?以体积代替不可以?第二,如何将内标物和待测样品混合到一起?第三,最后做样时,还是要称量待测样品的质量之后再与称量好的内标物混合到一起吗?那么计算时,用手工输入这些质量吗?
第一次做内标,身边人没有懂得,求大家帮忙。
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yzguo
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在系列标液的每个浓度样品瓶内,加入同一体积(ul 级)的内标物,然后测定。
mike021
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当然是做内标的曲线比较准,也要看内标是不是和样品。
zdp1010
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深有同感。请问谁能详细的描述内标法的原理和操作步骤,最好有例子
1xiaosuantou
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选取内标的原则:性质稳定,和你的待测物不发生反应,分析时,能够和待测物很好的分离,相互没有干扰,保留时间不要差的太远,也不要靠的太近了,峰面积接近,这个可以通过称样量控制。选择好内标后,先配个样品看一下精密度怎么样。
操作步骤:方法1:把标样和内标称在同一容量瓶里,内标和样品一起称在同一容量瓶里然后定容。方法2:也可以先把内标溶液配好,称好标样和样品后,用移液管移取同样体积的内标溶液溶解标样和样品。
如果你是要做标准曲线,先配好不加内标的母液,稀释的时候在工作溶液中移取一定体积的内标溶液,然后定容。这样每个浓度的工作溶液中都含有相同量的内标。用待测物浓度做横坐标,待测物峰面积和内标物峰面积比值做纵坐标。做标准曲线。
计算公式:相对校正因子f=(m标*A内*p标样纯度)/(m内*A标)
          w(%)=(f*A样*m内*100)/(A内*m样)
liangting
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原文由 1xiaosuantou(1xiaosuantou) 发表:
选取内标的原则:性质稳定,和你的待测物不发生反应,分析时,能够和待测物很好的分离,相互没有干扰,保留时间不要差的太远,也不要靠的太近了,峰面积接近,这个可以通过称样量控制。选择好内标后,先配个样品看一下精密度怎么样。
操作步骤:方法1:把标样和内标称在同一容量瓶里,内标和样品一起称在同一容量瓶里然后定容。方法2:也可以先把内标溶液配好,称好标样和样品后,用移液管移取同样体积的内标溶液溶解标样和样品。
如果你是要做标准曲线,先配好不加内标的母液,稀释的时候在工作溶液中移取一定体积的内标溶液,然后定容。这样每个浓度的工作溶液中都含有相同量的内标。用待测物浓度做横坐标,待测物峰面积和内标物峰面积比值做纵坐标。做标准曲线。
计算公式:相对校正因子f=(m标*A内*p标样纯度)/(m内*A标)
          w(%)=(f*A样*m内*100)/(A内*m样)

谢谢你得回答,但是还是操作上不明白。第一,配制内标液时,用水稀释定容可以吗?第二,做工作曲线时,相对校正因子的计算是否是工作站自动得出的?前提是输入浓度;第三,做待测样品时,也要将待测样品称量之后,和内标物一起稀释定容吗?
liangting
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原文由 yzguo(yzguo) 发表:
在系列标液的每个浓度样品瓶内,加入同一体积(ul 级)的内标物,然后测定。

你看我说的对不对。
一、溶液配制部分
1、称量ag的内标物,用蒸馏水稀释定容至250ml(假设),即为内标物溶液;
2、称量bg的待测样品的标准物质,稀释定容至250ml(假设),此即为对照品溶液;
3、从2中分别移取0ml、5ml、10ml、15ml、20ml(假设)对照品溶液,从1中移取10ml(假设)内标物溶液,两者混合在100ml容量瓶中,定容。于是的到五个新的溶液,其浓度分别为0、5*(b/250)*1000/100ml、10*(b/250)*1000/100ml、15*(b/250)*1000/100ml、20*(b/250)*1000/100ml;而内标液浓度为:a/250*10/100ml。
二、进样及数据处理部分
1、按照浓度由小到大进色谱仪分析(采用原来的面积归一法),为保证样品准确度,每个样品可重复三次;这时候如何证明我所出的数据正确呢?比方说,工作站所得数据都是百分含量,而我事先都是用的mg/100ml,是用两者之比吗?
通过这一步可以计算出校正因子,那么校正因子是手动计算还是输入数据后工作站自动得出的?
2、每次进样都需要在工作站中输入各物质的浓度?
3、建立标准曲线,分别提取五组谱图?什么时候把得出的校正因子输上?
标准曲线建立之后,方法也就建立了吗?
4、根据得出的方法,进待测样品。待测样品一样也要事先处理,取10ml待测样品称量,10ml上述内标物溶液,两者混合定容100ml。然后进样分析?
主要是在色谱仪上的操作,很迷糊。等待您的回复!
阿宝
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原文由 liangting(liangting) 发表:
原文由 1xiaosuantou(1xiaosuantou) 发表:
选取内标的原则:性质稳定,和你的待测物不发生反应,分析时,能够和待测物很好的分离,相互没有干扰,保留时间不要差的太远,也不要靠的太近了,峰面积接近,这个可以通过称样量控制。选择好内标后,先配个样品看一下精密度怎么样。
操作步骤:方法1:把标样和内标称在同一容量瓶里,内标和样品一起称在同一容量瓶里然后定容。方法2:也可以先把内标溶液配好,称好标样和样品后,用移液管移取同样体积的内标溶液溶解标样和样品。
如果你是要做标准曲线,先配好不加内标的母液,稀释的时候在工作溶液中移取一定体积的内标溶液,然后定容。这样每个浓度的工作溶液中都含有相同量的内标。用待测物浓度做横坐标,待测物峰面积和内标物峰面积比值做纵坐标。做标准曲线。
计算公式:相对校正因子f=(m标*A内*p标样纯度)/(m内*A标)
          w(%)=(f*A样*m内*100)/(A内*m样)

谢谢你得回答,但是还是操作上不明白。第一,配制内标液时,用水稀释定容可以吗?第二,做工作曲线时,相对校正因子的计算是否是工作站自动得出的?前提是输入浓度;第三,做待测样品时,也要将待测样品称量之后,和内标物一起稀释定容吗?

首先溶剂是要选定好的,不一定是水。好多有机溶剂不溶于水,用水作溶剂 岂不是要分层?
另外和你用的工作站也有关系,工作站功能多得话,内标法公式 工作站里面都有,直接代入数据即可
liangting
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[首先溶剂是要选定好的,不一定是水。好多有机溶剂不溶于水,用水作溶剂 岂不是要分层?
另外和你用的工作站也有关系,工作站功能多得话,内标法公式 工作站里面都有,直接代入数据即可
嗯,明白了。谢谢您!另外那个,我帖子发重复了,当时没有找到怎么删除,现在知道怎么删除了,被锁了,那个。。。我怎么才能被解帖然后删除重复的帖子呢?
beyond1977
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皮皮鱼
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具体情况具体分析,内标法并不是死板到一成不变。对不同的样品,内标法用起来差异很大的。如果希望得到解决,还是把具体问题说清楚吧。否则从理论上说,有无数种做法。
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