主题：【第七届原创】检测米粉中VD2、VD3方法如何好

    米粉1样品色谱图：

米粉2样品色谱图：

    这个条件VD2和VD3分离度有点差，得调整下色谱条件，优化下色谱峰形。

    色谱条件中色谱柱、流速、流动相、柱温、进样量这些都可以调整，下面我们先换根色谱柱看看效果：

    VD2、VD3标准品色谱图（各1.0mg/L）：

    米粉1样品色谱图：

    米粉2样品色谱图：

    这根色谱柱柱效还不错，出峰时间不仅有所提前，分离度也好了不少，这根色谱柱很适合检测这个样品。

    由于4.6mm内径的色谱柱最佳流速是1.0ml/min，流速这个条件我们就不做对比实验了（要想提高分离度，流速只能变小，因为流速越小出峰越晚，分离度就越好，但这样色谱峰形会变宽、变差，而对分离度起的作用也不会大）。

    要想提高分离度，柱温就得降低，柱温降低了出峰就会变晚，分离度就会变好。由于一般实验室的柱温箱不带制冷功能，那我们就控个室温看看效果吧：

    VD2、VD3标准品色谱图（各1.0mg/L）：

    改变柱温后出峰时间稍微晚了点，分离度却没好了多少，显然在这不太实用（在有的样品检测中很实用）。

    这个方法是反相色谱法，要想提高分离度，流动相有机含量就得降低，有机相降低了流动相极性就会变大，流动相极性变大了，洗脱能力就会降低，那样出峰就会晚，分离度就会好。那分别选个甲醇：水=90:10（V：V）和甲醇：水=80:20（V:V）看看效果吧：

    甲醇：水=90:10（V：V）时，VD2、VD3标准品色谱图（各1.0mg/L）：

    甲醇：水=90:10（V：V）时，米粉1样品色谱图：

    甲醇：水=80:20（V:V）时，VD2、VD3标准品色谱图（各1.0mg/L）：

    甲醇：水=80:20（V:V）时，米粉1样品色谱图：

    改变这个条件出峰时间推迟的较明显，分离度也稍微好了点，但峰形也差了些，这种方法在这不太实用（在有的样品检测中很实用）。

    要想提高分离度，色谱峰宽越小分离度就越好，半峰宽小，一是缩短检测时间，这种方法在这不合适（缩短检测时间分离度一般会变的更差）；二是减小进样体积，减小进样体积色谱峰宽就会小，分离度就会好；如果色谱峰太低，可以再适当加大样品浓度。下面看看减小进样量效果：

    10ul进样量时，VD2、VD3标准品色谱图（各1.0mg/L）：

    10ul进样量时，米粉1色谱图：

    5ul进样量时，VD2、VD3标准品色谱图（各1.0mg/L）：

    5ul进样量时，米粉1色谱图：

    显然这个方法也不错，分离度也较好。

    总之在样品检测时如果分离度变化，我们应该有很多办法来解决，但效果最好的应该是选一根柱效更好，更适合做这个样品的色谱柱，其次我们可以适当调整流动相、适当调整柱温、适当调整进样量或样品浓度中一个或几个条件（在这个样品检测中首先的是更换色谱柱，其次是减少进样量效果好些）。

    注意：由于每种样品的性质不同，调整每种色谱条件后的效果也可能大不相同，我们在实验时要具体问题具体分析、具体条件合理利用，切不可盲目行事。

    以上内容是个人点小小见解，希望能对大家有用。最后最大家工作愉快、顺利，国庆快乐！