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主题：【求助】硫酸软骨素含量测定

浏览0 回复7 电梯直达
lfenghx
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发表于：2010/07/21 23:19:31 楼主 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
大家好，请教！
硫酸软骨素含量测定按照2010年版药典，用酶解法HPLC测定。使用硫酸软骨素ABC酶。请问大家使用的是哪个厂家的酶？
我看很多文献使用的是sigma的产品。但我发现sigma的产品是冻干粉末，是以硫酸软骨素C为底物冻（支撑剂）干的。这样的话，酶里面就含硫酸软骨素了，我认为会对测定产生干扰。
不知道大家用的什么产品？
谢谢
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2010/7/21 23:21:30 沙发 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
即使对照品也是使用此酶进行酶解，看起来可以抵消干扰，但从理论上来说，还是不太合适吧，测定不是很准确。在进行方法写验证时，线性试验和回收率试验很难合格吧
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老多_小多
emoc98311
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2010/7/22 8:24:37 板凳 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
GB/T 20365-2006 硫酸软骨素和盐酸氨基葡萄糖含量的测定 液相色谱法
这个方法到是做过
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有水有渝
xky0230699
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2010/7/22 9:11:15 马扎 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
问过中国药品生物制品检定所没有这个酶吗？
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牛牛
wozhuanyong
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2010/7/22 9:15:17 地毯 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
我们用的就是sigam的标准品做酶解色谱，倒是没考虑过这个干扰，一直用了很久了。
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2010/7/22 20:21:21 地板 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
呵呵，谢谢大家回复和指点。
不知道是不是我英文水平太差了，把这个意思理解错了
Chondroitinase ABC from Proteus vulgaris
lyophilized powder, 0.3-3 units/mg solid (using chondroitin sulfate C as substrate)
我理解为：以硫酸软骨素C为底物（支撑剂）的冻干粉末。看来是我理解错了，这个破英文水平真害人，我找了一天这个酶。
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lfenghx
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2010/7/22 20:36:30 6楼 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
我还请教一下我楼上的“牛牛”。
你们做这个的时候是用的哪个厂家的色谱柱啊？药典上推荐Hypersil SAX阴离子交换色谱柱，我查了下，目前有国产的大连依利特Hypersil SAX色谱柱，只要1300一根，有原装进口的Hypersil SAX色谱柱药2200以上一根。
请问您用的哪个厂家的呢？效果怎么样啊。
还有就是测这个有什么注意的没有啊？
三羟甲基氨基甲烷和三水乙酸钠只要AR级别的就行了吧？
谢谢您
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wsdh1981
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2010/8/4 13:13:31 7楼 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
请教一下牛牛，你用的是2010版中国药典的方法，使用的是什么型号的液相啊
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