主题：【转帖】辣椒面中罗丹明B的检测

辣椒面中的罗丹明B（Rhodamine B）的测定
1.    适用范围
适用于辣椒面中罗丹明 B的测定。
2.    提取
精确称取1g 辣椒面于50 mL聚丙烯离心管中，加入20 mL丙酮：正己烷（20:80）混合溶液，300 rpm振荡10 min，4000 rpm离心5 min，转移上清液于50 mL离心管中，残渣重复提取一次，合并上清液，于40℃氮吹至10 mL左右，待净化。
3.    净化
预处理：向Welchrom® Alumina-N（500mg/6mL）中加入5 mL丙酮：正己烷（20:80）混合溶液，流出液弃去；
上样：将上述提取液加入柱中，流出液弃去，此时，含罗丹明B的样品在柱上部会出现鲜亮的粉红色的荧光条带，条带边缘清晰，粉红色随含量的增加而加深和加宽，不含罗丹明B的样品提取液不会出现粉红色条带，只会出现黄红色的界面不清晰的宽带；
淋洗：加入含有20%丙酮的正己烷溶液淋洗SPE柱，可见柱体上的黄红色条带下移，直到黄色条带洗出柱体为止；
洗脱：5 mL甲醇：水（90:10）洗脱（不同活度的氧化铝选择的洗脱液不一样，Welchrom® Alumina-N为Beckman Ⅰ级，采用纯甲醇洗脱时，需要大量的洗脱液才能将罗丹明B 洗脱下来，故在此加入10%的水以提高洗脱强度）；
重新溶解：采用90%甲醇水溶液定容至5 mL，过0.22μm滤膜，装瓶待分析；
4.    检测
色谱条件：
色谱柱： TopsilTM C18 液相色谱柱（4.6 mm x 250 mm, 5 μm）
流动相： 甲醇：水=75:25
流速： 1 mL/min
进样量： 20 μL
柱温： 40°C
检测波长： 554 nm
运行时间：11 min
5.    结果
回收率和重现性实验
将空白辣椒面上述方法处理后，分别添加一定量的标准溶液，添加浓度分别为0.2 mg/kg、0.5 mg/kg、2 mg/ kg、每批次内同一浓度做3次平行实验，共3个批次（样品典型回收率色谱图见附图）。
添加水平（mg/kg）

分析物    0.2    0.5    2.0
    Recovery (%)    RSD (%)    Recovery (%)    RSD (%)    Recovery (%)    RSD (%)
罗丹明B    90.6    6.32    93.7    4.55    95.2    4.78
6.附图

        辣椒面中添加0.5 mg/kg 罗丹明B色谱图








Welchrom®  Alumina-N上样后图片
本方法中使用到得耗材：
1．    固相萃取小柱 Welchrom® Alumina-N  500mg/6mL (P/N:WSAN010605)
2．    色谱柱：TopsilTM, 4.6*250 mm，5μm（P/N: Tp5B18425）
3．    13mm，孔径0.22μm尼龙针孔滤膜（P/N: WEL-SFNY213022）