主题：【第十五届原创】SiO2-[P888Allyl]Br色谱柱分离磷脂

SiO₂-[P_888Allyl]Br色谱柱分离磷脂

标准品

首先采用不同类别的磷脂标准品考察了SiO₂-[P_888Allyl]Br色谱柱对磷脂样品的分离选择性。如图所示，以甲醇/水（90/10，v/v）为流动相，DPPA、DPPE和DOPC可实现基线分离。在相同的色谱条件下，SiO₂-NH₂色谱柱同样能够实现对不同类别磷脂的分离（图b）。由于磷脂具有较强的疏水性，其在SiO₂-[P_888Allyl]Br色谱柱中具有更强的保留。

图  混磷脂类别在SiO₂-[P_888Allyl]Br色谱柱（a）和SiO₂-NH₂柱（b）中的分离谱图

进一步采用DSPC、DPPC、DMPC和LysoPC评价了SiO₂-[P_888Allyl]Br色谱柱对不同磷脂种类的分离选择性。如图a所示，以甲醇/水（80/20，v/v）作为流动相，在28 min内，不同酰基侧链长度的PC在SiO₂-[P_888Allyl]Br色谱柱中可以实现高效分离。然而，在相同的色谱条件下，SiO₂-NH₂色谱柱中LysoPC、DPPC和DMPC完全重叠在一起，且与DSPC只能实现部分分离（图b）。继续将流动相中甲醇的含量增大至99%，虽然与DSPC实现完全分离，但是LysoPC、DPPC和DMPC仍然被同时洗脱出来（图c）。因此，所制备的SiO₂-[P_888Allyl]Br色谱柱可以同时实现磷脂类别和种类的分离分析。

图  混PC在SiO₂-[P_888Allyl]Br色谱柱（a）和SiO₂-NH₂柱（b，c）中的分离谱图

SiO₂-[P_888Allyl]Br色谱柱分离大豆卵磷脂和肺腺癌细胞膜磷脂提取物

大豆卵磷脂是一种典型的植物提取磷脂，它已经被证明可以通过影响血管舒张和抑制一种参与调节血压的关键酶来降低高血压的风险，此外还可以改善血糖和血脂。近期发现大豆卵磷脂还具有减肥功效，因此在营养补充剂市场上广受欢迎。大豆卵磷脂是一种复合脂类样品，主要由PC、PE和PI以及其他次要成分组成。快速高效的大豆卵磷脂分离检测方法对大豆卵磷脂的质量监测和质量控制尤为重要。进一步采用大豆卵磷脂提取样品考察了SiO₂-[P_888Allyl]Br色谱柱对复杂磷脂样品的分离性能。如图所示，以甲醇/乙腈/水（50/40/10，v/v/v）作为流动相，SiO₂-[P_888Allyl]Br色谱柱可以在8 min内观察到4个主要色谱峰。在相同的色谱条件下，选用DPPE作为磷脂标准品来识别上述色谱峰，位于3.2 min时的2号峰与DPPE峰位置相重合。上述结果表明，SiO₂-[P_888Allyl]Br色谱柱可以实现复杂的大豆卵磷脂样品的分离分析。

图 大豆卵磷脂和DPPE标准品在SiO₂-[P_888Allyl]Br色谱柱中的分离谱图