辣椒和辣椒油中总辣椒素含量的测定(ISO 7543-1标准翻译)
阿拉山口检验检疫局技术中心 赵晶晶 贺国庆
中哈管道石油公司 常健辉 译第一部分:分光光度法前言:国际标准化组织(ISO)是由各国标准化团体(ISO成员团体)组成的世界性联合会。制定国际标准的工作通常由ISO的技术委员会完成,各成员团体若对某技术委员会确立的项目感兴趣,均有权参加该委员会的工作。与ISO保持联系的各国际组织(官方的或非官方的)也可参加有关工作。在电工技术标准化方面,ISO与国际电工委员会(IEC)保持密切合作关系。
由技术委员会通过的国际标准草案提交各成员团体表决,需取得至少75%参加表决的成员团体的同意,才能作为国际标准正式发布。国际标准ISO-7543-1由技术委员会ISO/TC 34 /农业食品产品/SC 7/调味品 制定。ISO 7543 辣椒和辣椒油中总辣椒素含量的测定包括以下部分:第一部分:分光光度法第二部分:高效液相色谱法ISO 1994版权所有。除非特别规定,未经出版者的允许,任何印刷物的部分不得复制或以其他形式使用-电子或文字的(包括照片复制和微缩胶片)。国际标准化组织瑞士 Geneve CH-1211 56号邮政信箱瑞士印刷国际标准化组织版权所有2002年11月6日 星期三 13:15:2002辣椒和辣椒油中总辣椒素含量的测定第一部分:分光光度法1 范围ISO 7543 标准规定了用分光光度法测定辣椒、辣椒粉和辣椒油中总辣椒素含量的方法。本方法的分析需用活性炭脱色。在某些实验条件下,如不进行脱色,则必须参考ISO 7543-21的高效液相色谱法来测定辣椒素含量。2 标准文献下列标准所包含的条文,通过在本标准中的引用而构成本标准的条文。本标准出版时,所示版本均为有效。所有标准都会被修订,使用本标准的各方应探讨使用下列标准最新版本的可能性。IEC和ISO的成员持有最新有效的国际标准。ISO 2825:1981,调味品—供分析样品的制定。3 原理用甲醇提取辣椒和辣椒油中的辣椒素,在248nm和296nm测定吸光度。3.1 辣椒粉按ISO 7543 中规定的方法,用四氢肤喃提取,用分光光度计测定辣椒素。3.2 整个辣椒按ISO 7543 中规定的方法,粉碎样品,然后用四氢肤喃提取,用分光光度计测定辣椒素。3.3 辣椒油按ISO 7543 中规定的方法,用甲醇稀释辣椒油,用分光光度计测定辣椒素。4 试剂除非特别说明,本方法只使用分析纯试剂,蒸馏水,去离子水或相同纯度的水。4.1 活性炭,分析使用。4.2 甲醇,光谱纯。4.3甲醇水溶液:70+30(V:V)。4.4盐酸溶液c(HCl)=1mol/L。4.5 氢氧化钠溶液,新制备的,c(NaOH)=1mol/L。4.6 四氢肤喃,新蒸馏的或者光谱纯。5 仪器常用实验仪器和专用仪器5.1单标线容量瓶:25mL,100mL,250mL。5.2 分光光度计,单波长或者双波长,可测定220nm和370nm时的吸光度,配有1cm光路的石英比色皿。5.3磁力搅拌器5.4过滤膜:0.45μm。5.5 回流提取装置:索氏提取器型,配250mL广口平底烧瓶。5.6真空旋转蒸发器。5.7水浴5.8 分析筛:500μm。5.9分析天平,称量精确度为±0.0001g。6 取样确保样品具有代表性,并且在运输和储存过程过程中没有损坏,这一点非常重要。该标准未对取样做出具体规定,推荐使用ISO9482)。7 样品制备7.1辣椒粉7.1.1 将所有粉用500μm筛(5.8)筛一遍,筛上物按照ISO 2825粉碎成粉末,直到获得合适的尺寸,然后混匀。7.1.2 称重,精确到0.01g,称取10克左右的均匀粉末(7.1.1),将其转移到回流提取器中。7.1.3 用100 mL四氢肤喃提取8小时。(4.6)在水浴条件下,用旋转蒸发器减压蒸馏至近干。7.2 整个辣椒7.2.1按照ISO 2825粉碎辣椒,直到粉末全都可以通过500μm筛孔。筛后混匀。7.2.2称重,精确到0.01g,称取10克左右的均匀粉末(7.1.1),将其转移到回流提取器中。7.2.3用100 mL四氢肤喃提取8小时。(4.6)在水浴条件下,用旋转蒸发器减压蒸馏至近干。7.3辣椒油7.3.1充分混匀辣椒油。7.3.2称重,称0.5到1g混匀后的辣椒油(7.3.1),精确到0.0001g,放入回流提取器中。8 步骤8.1实验溶液制备8.1.1辣椒,整个辣椒或者辣椒粉添加0.05g到0.10g活性炭到7.1.3或7.2.3中获得的提取液中,保证提取液和碳黑之间是10:1的比例。加90mL甲醇水溶液。(4.3)用磁力搅拌器(5.3)搅拌30min,静置5分钟。用过滤膜(5.1)过滤到100mL容量瓶中,甲醇水溶液(4.3)稀释到刻度。过滤膜应该洁净。实验中如出现淡黄色不影响实验结果。8.1.2辣椒油在7.3.2中获得的提取液中,添加0.05g到0.10g活性炭,保证辣椒油和活性炭之间的比例是10:1。加90mL甲醇水溶液(4.3)。用磁力搅拌器(5.3)搅拌30min,静置5分钟。用过滤膜(5.1)过滤到100mL容量瓶中,甲醇水溶液(4.3)稀释到刻度。过滤膜应该洁净。实验中如出现淡黄色不影响实验结果。8.2测量溶液的制备8.2.1将下列溶液转移到25mL容量瓶(5.1)中。—3mL水。—2mL盐酸(4.4)。用甲醇(4.2)稀释到刻度。此溶液是空白酸溶液(A)。8.2.2将下列溶液转移到25mL容量瓶(5.1)中。—3mL水。—2mL氢氧化钠。(4.5)用甲醇(4.2)稀释到刻度。此溶液是空白碱溶液(B)。8.2.3.取三个25mL的容量瓶(5.1),分别标记a1,a2,a3,将下列溶液转移至容量瓶。—1mL从8.1.1和8.1.2中获得的滤液。—2.7mL水。—2mL盐酸溶液(4.4)。用甲醇(4.2)稀释到刻度。8.2.4取三个25mL的容量瓶(5.1),分别标记b1,b2,b3,将下列溶液转移至容量瓶。—1mL从8.1.1和8.1.2中获得的滤液。—2.7mL水。—2mL氢氧化钠溶液(4.5)。用甲醇(4.2)稀释到刻度。8.3分光光度测定。8.3.1双波长分光光度计用甲醇水溶液(4.3)调整吸光度0和100%。在波长248nm和296nm,将空白碱溶液(B)放在测量池,将空白酸溶液(A)放在参比池,测量空白的吸光度。在波长248nm和296nm,将b1的溶液放在测量池,a1的溶液放在参比池,测量每个样品溶液的吸光度,然后分别测量b2和a2,b3和a3。8.3.2 单波长分光光度计用甲醇溶液(4.3)调整吸光度0和100%。放置溶液B在测量池,重新调整仪器的吸光度,然后在248nm和296nm分别测量a1,a2,a3的吸光度。然后将溶液A放在测量池,在248nm和296nm分别测量b1,b2,b3的吸光度。9计算9.1用以下公式计算在波长248nm总辣椒素含量w248,质量百分含量。其中AS:样品溶液的吸光度Ab:空白溶液的吸光度d:稀释因子(在ISO7543的操作条件下等于25×100)m:质量,单位g。当吸光度大于0.8时使用另一种稀释剂。9.2用以下公式计算在波长296nm总辣椒素含量w296,质量百分含量。其中A/S :样品溶液的吸光度;A/b :空白溶液的吸光度;d :稀释因子(在ISO7543的操作条件下等于25×100)m:质量,单位g。当吸光度大于0.8时使用另一种稀释剂。9.3 248nm和296nm获得的测量结果不应该大于10%,如果不是这样的话要重新测量。10 实验报告实验报告应包括:—如果已知的话列出取样方法。—使用的方法。—获得的测试结果—如果检查过重复性,列出最后结果应该描述所有没有在ISO 7543中规定的实验细节或者可选择的实验细节,这些细节有可能影响实验结果。实验报告应该包括所有完整样品的必须信息。11注释:1)ISO 7543—1993,辣椒和辣椒油中总辣椒素含量的测定—高效液相色谱法2)ISO 948:1980 ,调味品,取样ICS 67.220.10描述:农业产品,食品产品,植物产品,调味品,香料,辣椒,化学分析,含量测定,分光光度法详见附件