主题:【求助】流动相为乙腈和0.05%TFA(加三乙胺调pH=3),基线是波浪型,咋改善,急啊

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cyfbobby
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之前也遇到类似的问题,一般都是流动相用到缓冲盐时会遇到此类问题.可能是柱子中的缓冲盐没有冲洗干净,造成柱子污染引起的
〓猪哥哥〓
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应该是波长处于末端。试试换一个波长,如254NM试试看,走走基线
happy王子矜
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205nm下,用TFA不要在意基线了,肯定不好的。啥级别的也不行。色谱纯的也不行。


背景吸收太大了,干扰太大。你哪里找的这个方法?
有水有渝
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205下本来就很难平衡,背景吸收无法克服,看一下,只要对峰面积影响不大,就先用着吧.
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Last edit by xky0230699
tanggangfeng
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原文由 tmeda 发表:
流动相为乙腈和0.05%TFA(加三乙胺调pH=3),基线是波浪型,检测波长205nm,TFA为非色谱纯,是啥原因,咋改善?谢谢了


在205下是没法避免的, 你说的 波浪型,+-偏差多少。
人在江湖
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原文由 tanggangfeng 发表:

在205下是没法避免的, 你说的 波浪型,+-偏差多少。


+ -6mAU

我测的是三萜皂甙,响应值也很小
人在江湖
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原文由 wangzijin 发表:
205nm下,用TFA不要在意基线了,肯定不好的。啥级别的也不行。色谱纯的也不行。


背景吸收太大了,干扰太大。你哪里找的这个方法?



罗汉果甜苷的 HPLC法分析
guoke121
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TFA的截止波长是210nm,你的检测波长是205nm,不出现你那种情况才怪呢,真不知道你的方法是谁开发出来的,把TFA换成磷酸盐缓冲液,用磷酸调PH=2.8试试。
happy王子矜
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原文由 tmeda 发表:
原文由 wangzijin 发表:
205nm下,用TFA不要在意基线了,肯定不好的。啥级别的也不行。色谱纯的也不行。


背景吸收太大了,干扰太大。你哪里找的这个方法?



罗汉果甜苷的 HPLC法分析




人家是做的一个定性的方法,你要拿来定量么?
人在江湖
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原文由 wangzijin 发表:

人家是做的一个定性的方法,你要拿来定量么?


看他的色谱图比我的好,所以试了一下。
效果不好啊。。。。。。
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