主题：【讨论】焦糖色素中的4-甲基咪唑，致癌？没事！

不论是否是食品添加剂啊，总伴有少量/微量无营养价值或有害物质，既要引起重视，又不能矫枉过正

原文由 凯子蒸包子(zk19831125) 发表:
不论是否是食品添加剂啊，总伴有少量/微量无营养价值或有害物质，既要引起重视，又不能矫枉过正

是啊。不能因噎废食，宣传与引导工作也要到位。公正客观的评价，很重要。

请问4-甲基咪唑用什么方法测定比较好呢？

原文由 symmacros(jimzhu) 发表:
请问4-甲基咪唑用什么方法测定比较好呢？

“GB 8817-2001食品添加剂焦糖色（亚硫酸铵法、氨法、普通法）”，国标中使用的是薄层色谱法。

针对薄层色谱可能定性不准的情况，也有使用液相的。

DB13/T 1116-2009 焦糖色中的4-甲基咪唑的测定高效液相色谱法，地方标准使用的是高效液相色谱法。

下面将根据河北省地方标准DB13/T 1116-2009《焦糖色中的4-甲基咪唑的测定 高效液相色谱法》对检测方法做介绍。

6分析步骤

6.1 样品处理 准确称取3g样品（精确至0. 001 g)，加15mL水溶解，移入250 mL分液漏斗中，加100 g/L碳酸钠溶液15 mL，加三氯甲烷一无水乙醇萃取液60 mL，剧烈振摇5 min。静置分层后，将有机相移入另一分液漏斗中，水相再按同样方法萃取一次，合并有机相；用100 g/L碳酸钠溶液洗涤提取液3次，每次30mL。然后将有机相通过无水硫酸钠滤入旋转蒸发瓶中，50℃浓缩至近干，取下，以水溶解残渣并定容至10mL，经0.45μm微孔膜过滤后供HPLC分析。

6. 2测定

6.2.1 HPLC参考条件

分析柱：C18, 4. 6 mm×250 mm粒度5 μm。

流动相：甲醇: 0. 05 mol/L磷酸二氢钾缓冲液（(pH 3. 5，含0. 1％庚烷磺酸钠）=5: 95。

波长：210nm。

流速：1. 0 mL/min。

6.2.2标准曲线：分别进标准系列溶液各10 μL，进行HPLC分析，然后以峰面积为纵坐标，以4一甲基咪唑的含量为横坐标，绘制标准曲线。

6.2.3试样测定：吸取6. 1处理后的试样溶液10 μL进行HPLC分析，测定其峰面积，从标准曲线查得测定液中4一甲基咪唑的含量

7结果计算

试样中4一甲基咪唑的含量按下式计算：

式中：

X一试样中4一甲基咪唑的含量，单位为毫克每千克（mg/kg) ;

c一由标准曲线上查得进样液中4一甲基咪唑的量，单位为微克每毫升（μg/mL) ;

V一试样稀释液总体积，单位为毫升（mL) ;

m一试样质量，单位为克（g) ;

计算结果保留两位有效数字。

还有使用气相色谱法的。

■ 气相色谱法
柱 温：初温60 ℃，保持3min，以10 ℃/min升温至
180 ℃，保持5 min；进样口温度200 ℃；
检测器：NPD，温度260 ℃；
载 气 ：高纯氮气，流速1 mL/min；
氢 气 ：2 mL/min，空气:60 mL/min；
尾吹气：30 mL/min， 分流比为50:1；
顶空瓶加热温度100 ℃，平衡时间30 min；
进样量：1 mL
内标物：N, N-二甲基苯胺

原文由 花开见我(cai008) 发表:

原文由 symmacros(jimzhu) 发表:
请问4-甲基咪唑用什么方法测定比较好呢？

“GB 8817-2001食品添加剂焦糖色（亚硫酸铵法、氨法、普通法）”，国标中使用的是薄层色谱法。

针对薄层色谱可能定性不准的情况，也有使用液相的。

DB13/T 1116-2009 焦糖色中的4-甲基咪唑的测定高效液相色谱法，地方标准使用的是高效液相色谱法。

下面将根据河北省地方标准DB13/T 1116-2009《焦糖色中的4-甲基咪唑的测定 高效液相色谱法》对检测方法做介绍。

6分析步骤

6.1 样品处理 准确称取3g样品（精确至0. 001 g)，加15mL水溶解，移入250 mL分液漏斗中，加100 g/L碳酸钠溶液15 mL，加三氯甲烷一无水乙醇萃取液60 mL，剧烈振摇5 min。静置分层后，将有机相移入另一分液漏斗中，水相再按同样方法萃取一次，合并有机相；用100 g/L碳酸钠溶液洗涤提取液3次，每次30mL。然后将有机相通过无水硫酸钠滤入旋转蒸发瓶中，50℃浓缩至近干，取下，以水溶解残渣并定容至10mL，经0.45μm微孔膜过滤后供HPLC分析。

6. 2测定

6.2.1 HPLC参考条件

分析柱：C18, 4. 6 mm×250 mm粒度5 μm。

流动相：甲醇: 0. 05 mol/L磷酸二氢钾缓冲液（(pH 3. 5，含0. 1％庚烷磺酸钠）=5: 95。

波长：210nm。

流速：1. 0 mL/min。

6.2.2标准曲线：分别进标准系列溶液各10 μL，进行HPLC分析，然后以峰面积为纵坐标，以4一甲基咪唑的含量为横坐标，绘制标准曲线。

6.2.3试样测定：吸取6. 1处理后的试样溶液10 μL进行HPLC分析，测定其峰面积，从标准曲线查得测定液中4一甲基咪唑的含量

7结果计算

试样中4一甲基咪唑的含量按下式计算：

式中：

X一试样中4一甲基咪唑的含量，单位为毫克每千克（mg/kg) ;

c一由标准曲线上查得进样液中4一甲基咪唑的量，单位为微克每毫升（μg/mL) ;

V一试样稀释液总体积，单位为毫升（mL) ;

m一试样质量，单位为克（g) ;

计算结果保留两位有效数字。

还有使用气相色谱法的。

■ 气相色谱法
柱 温：初温60 ℃，保持3min，以10 ℃/min升温至
180 ℃，保持5 min；进样口温度200 ℃；
检测器：NPD，温度260 ℃；
载 气 ：高纯氮气，流速1 mL/min；
氢 气 ：2 mL/min，空气:60 mL/min；
尾吹气：30 mL/min， 分流比为50:1；
顶空瓶加热温度100 ℃，平衡时间30 min；
进样量：1 mL
内标物：N, N-二甲基苯胺

国标中使用的是薄层色谱法，感觉有点落后了，薄层的灵敏度低，操作麻烦，其它方法要好些。

原文由 symmacros(jimzhu) 发表:

原文由 花开见我(cai008) 发表:

原文由 symmacros(jimzhu) 发表:
请问4-甲基咪唑用什么方法测定比较好呢？

“GB 8817-2001食品添加剂焦糖色（亚硫酸铵法、氨法、普通法）”，国标中使用的是薄层色谱法。

针对薄层色谱可能定性不准的情况，也有使用液相的。

DB13/T 1116-2009 焦糖色中的4-甲基咪唑的测定高效液相色谱法，地方标准使用的是高效液相色谱法。

下面将根据河北省地方标准DB13/T 1116-2009《焦糖色中的4-甲基咪唑的测定 高效液相色谱法》对检测方法做介绍。

6分析步骤

6.1 样品处理 准确称取3g样品（精确至0. 001 g)，加15mL水溶解，移入250 mL分液漏斗中，加100 g/L碳酸钠溶液15 mL，加三氯甲烷一无水乙醇萃取液60 mL，剧烈振摇5 min。静置分层后，将有机相移入另一分液漏斗中，水相再按同样方法萃取一次，合并有机相；用100 g/L碳酸钠溶液洗涤提取液3次，每次30mL。然后将有机相通过无水硫酸钠滤入旋转蒸发瓶中，50℃浓缩至近干，取下，以水溶解残渣并定容至10mL，经0.45μm微孔膜过滤后供HPLC分析。

6. 2测定

6.2.1 HPLC参考条件

分析柱：C18, 4. 6 mm×250 mm粒度5 μm。

流动相：甲醇: 0. 05 mol/L磷酸二氢钾缓冲液（(pH 3. 5，含0. 1％庚烷磺酸钠）=5: 95。

波长：210nm。

流速：1. 0 mL/min。

6.2.2标准曲线：分别进标准系列溶液各10 μL，进行HPLC分析，然后以峰面积为纵坐标，以4一甲基咪唑的含量为横坐标，绘制标准曲线。

6.2.3试样测定：吸取6. 1处理后的试样溶液10 μL进行HPLC分析，测定其峰面积，从标准曲线查得测定液中4一甲基咪唑的含量

7结果计算

试样中4一甲基咪唑的含量按下式计算：

式中：

X一试样中4一甲基咪唑的含量，单位为毫克每千克（mg/kg) ;

c一由标准曲线上查得进样液中4一甲基咪唑的量，单位为微克每毫升（μg/mL) ;

V一试样稀释液总体积，单位为毫升（mL) ;

m一试样质量，单位为克（g) ;

计算结果保留两位有效数字。

还有使用气相色谱法的。

■ 气相色谱法
柱 温：初温60 ℃，保持3min，以10 ℃/min升温至
180 ℃，保持5 min；进样口温度200 ℃；
检测器：NPD，温度260 ℃；
载 气 ：高纯氮气，流速1 mL/min；
氢 气 ：2 mL/min，空气:60 mL/min；
尾吹气：30 mL/min， 分流比为50:1；
顶空瓶加热温度100 ℃，平衡时间30 min；
进样量：1 mL
内标物：N, N-二甲基苯胺

国标中使用的是薄层色谱法，感觉有点落后了，薄层的灵敏度低，操作麻烦，其它方法要好些。

是的。国标才2001年制定的。到现在很久了。

原文由 花开见我(cai008) 发表:

原文由 symmacros(jimzhu) 发表:
请问4-甲基咪唑用什么方法测定比较好呢？

“GB 8817-2001食品添加剂焦糖色（亚硫酸铵法、氨法、普通法）”，国标中使用的是薄层色谱法。

针对薄层色谱可能定性不准的情况，也有使用液相的。

DB13/T 1116-2009 焦糖色中的4-甲基咪唑的测定高效液相色谱法，地方标准使用的是高效液相色谱法。

下面将根据河北省地方标准DB13/T 1116-2009《焦糖色中的4-甲基咪唑的测定 高效液相色谱法》对检测方法做介绍。

6分析步骤

6.1 样品处理 准确称取3g样品（精确至0. 001 g)，加15mL水溶解，移入250 mL分液漏斗中，加100 g/L碳酸钠溶液15 mL，加三氯甲烷一无水乙醇萃取液60 mL，剧烈振摇5 min。静置分层后，将有机相移入另一分液漏斗中，水相再按同样方法萃取一次，合并有机相；用100 g/L碳酸钠溶液洗涤提取液3次，每次30mL。然后将有机相通过无水硫酸钠滤入旋转蒸发瓶中，50℃浓缩至近干，取下，以水溶解残渣并定容至10mL，经0.45μm微孔膜过滤后供HPLC分析。

6. 2测定

6.2.1 HPLC参考条件

分析柱：C18, 4. 6 mm×250 mm粒度5 μm。

流动相：甲醇: 0. 05 mol/L磷酸二氢钾缓冲液（(pH 3. 5，含0. 1％庚烷磺酸钠）=5: 95。

波长：210nm。

流速：1. 0 mL/min。

6.2.2标准曲线：分别进标准系列溶液各10 μL，进行HPLC分析，然后以峰面积为纵坐标，以4一甲基咪唑的含量为横坐标，绘制标准曲线。

6.2.3试样测定：吸取6. 1处理后的试样溶液10 μL进行HPLC分析，测定其峰面积，从标准曲线查得测定液中4一甲基咪唑的含量

7结果计算

试样中4一甲基咪唑的含量按下式计算：

式中：

X一试样中4一甲基咪唑的含量，单位为毫克每千克（mg/kg) ;

c一由标准曲线上查得进样液中4一甲基咪唑的量，单位为微克每毫升（μg/mL) ;

V一试样稀释液总体积，单位为毫升（mL) ;

m一试样质量，单位为克（g) ;

计算结果保留两位有效数字。

还有使用气相色谱法的。

■ 气相色谱法
柱 温：初温60 ℃，保持3min，以10 ℃/min升温至
180 ℃，保持5 min；进样口温度200 ℃；
检测器：NPD，温度260 ℃；
载 气 ：高纯氮气，流速1 mL/min；
氢 气 ：2 mL/min，空气:60 mL/min；
尾吹气：30 mL/min， 分流比为50:1；
顶空瓶加热温度100 ℃，平衡时间30 min；
进样量：1 mL
内标物：N, N-二甲基苯胺

刚查了一下 这个地标方法已经废止

但没有取代的方法