主题:【分享】样品预处理——单糖与低聚糖的测定

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在糖的提取过程中,常常有干扰物质对糖的提取产生干扰,常见的干扰物质包括:①将糖包围在其内部的脂类;②影响过滤的果胶等多糖干扰物质;③植物中含有的有机酸,其将参与糖的化学反应,导致蔗糖发生水解;④对比色法、旋光法测定糖产生影响的色素;⑤氨基酸、糖苷(甙)等具有旋光性的光活性物质,会影响糖的旋光法测定。
去除干扰物质的常见方法是:将称重样品放在滤纸上,先用50mL石油醚,分五次洗涤,除去样品中所含有的脂类、叶绿素等。再加入澄清剂,除去果胶、蛋白质及有旋光性的物质。若有机酸存在时,只需将反应保持在中性进行即可。新鲜果实常含有糖的分解酶,如鲜橘水提取液,其酶的活性很大,可加入少量氯化汞。
(1)含高脂肪的食品,如巧克力、蛋黄酱、奶酪等,通常须经脱脂后再用水进行提取。一般以石油醚处理一次或几次,必要时可加热;每次处理后,倒去石油醚,然后用水进行提取。
(2)含有大量淀粉、糊精及蛋白质的食品,如谷物制品、某些蔬菜、调味品,通常用70%-75%乙醇溶液进行提取。若单独使用水提取,会使样品中部分淀粉和糊精溶出或吸水膨胀,影响分析测定,同时过滤也困难。操作时,要求乙醇溶液的浓度应高到足以使淀粉和糊精沉淀,若样品含水量较高,混合后的最终浓度应控制在上述范围内。提取时,可加热回流,然后冷却并离心,倒出上清液,如此提取2一3次,合并提取液,蒸发除去乙醇。在70%一75%乙醇溶液中,蛋白质不会溶解出来,因此,用乙醇溶液作提取剂时,提取液不用除蛋白质。
(3)含酒精和二氧化碳的液体样品,通常蒸发至原体积的1/3一1/4,以除去酒精和CO2。若样品呈酸性,则在加热前应预先用氢氧化钠调节样品溶液的pH值至中性,以防止低聚糖在酸性条件下被部分水解。
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