主题：【原创】液相串联质谱仪检测22种中邻苯二甲酸酯类成分的含量

1 试剂和对照品
除特殊说明，所用试剂均为色谱纯。
1.1  试剂：甲酸，甲醇，氯化钠（分析纯），乙腈
1.2  对照品：邻苯二甲酸酯类混合对照（供含量测定用）、DNP（供含量测定用）
2 仪器
2.1  液相质谱联用仪（API3200）
2.2  分析天平
2.3  超声震荡器
2.4  涡旋仪
2.5  离心机
2.6  氮吹仪
3  分析方法
3.1 色谱参考条件1-适用于DNP
3.1.1 色谱柱：以十八烷基硅烷健合硅胶为填充剂（柱长5cm，内径4.6mm，粒径2.7μm ）或同等性能的色谱柱
3.1.2 柱温：40℃
3.2 色谱参考条件2-适用于剩余的22种塑化剂
3.2.1 色谱柱：以十八烷基硅烷健合硅胶为填充剂（柱长5cm，内径4.6mm，粒径2.7μm ）或同等性能的色谱柱与以十八烷基硅烷健合硅胶为填充剂（柱长15cm，内径4.6mm，粒径5μm ）或同等性能的色谱柱两根串联
3.2.2 柱温：40℃
3.2.3 流动相：
时间（分钟）    流速(ml/min)    0.1%甲酸水溶液(%)    甲醇(%)
0.00    0.8    20    80
2.00    0.8    20    80
5.00    0.8    20    80
8.00    0.8    2    98
13.00    0.8    2    98
13.10    1.2    2    98
14.00    1.2    2    98
14.01    1.3    2    98
18.00    1.3    2    98
18.10    0.8    20    80
23.00    0.8    20    80

3.2.4 质谱条件：ESI+ 模式
化合物                       Q1    Q3    Time(msec)    ID    DP    EP    CE    CXP
邻苯二甲酸酯二壬酯    419.335    149.100    300    DNP 1    66.0    6.00    21.00    4.00
                   419.335    275.200    300    DNP 2    60.4    5.62    15.35    6.25
邻苯二甲酸酯二甲酯    195.1    163    20    DMP 1    15    10    16    3
                   195.1    135    20    DMP 2    15    10    35    3
邻苯二甲酸二乙酯    223.1    149.1    20    DEP 1    20    10    27    3
                   223.1    121.1    20    DEP 2    20    10    44    3
邻苯二甲酸二丙酯    251.2    149    20    DPrP1    23    10    17    3
                   251.2    191.1    20    DPrP2    23    10    17    3
邻苯二甲酸二异丙酯    251.2    149    20    DIPrP1    23    10    17    3
                   251.2    121.1    20    DIPrP2    23    10    17    3
邻苯二甲酸二烯丙酯    247.1    189.1    20    DAP 1    20    10    12    3
                   247.1    149.1    20    DAP 2    20    10    26    3
邻苯二甲酸二异丁酯    279.2    149    20    DIBP 1    23    10    22    3
                   279.2    205.1    20    DIBP 2    23    10    12    3
邻苯二甲酸二丁酯    279.2    149    20    DBP 1    23    10    22    3
                   279.2    205.1    20    DBP 2    23    10    12    3
邻苯二甲酸二（2-甲氧基）乙酯    283.2    207.1    20    DMEP 1    28    10    11    3
                           283.2    59.1    20    DMEP 2    28    10    30    3
邻苯二甲酸二异戊酯    307.2    71    20    DIPP1    30    10    25    3
                   307.2    149.1    20    DIPP2    30    10    21    3
邻苯二甲酸二（4-甲基-2-戊基）酯    335.3    149    20    BMPP 1    30    10    27    3
                     335.3    167.1    20    BMPP 2    30    10    18    3
邻苯二甲酸二（2-乙氧基）乙酯    311.2    221.1    20    DEEP 1    30    10    12    3
                           311.2    73.1    20    DEEP 2    30    10    21    3
邻苯二甲酸二戊酸    307.2    149.1    20    DPP1    30    10    21    3
                   307.2    219.1    20    DPP2    30    10    12    3
邻苯二甲酸丁基苄基酯    313.2    91.1    20    BBP 1    30    10    40    3
                   313.2    149.1    20    BBP 2    30    10    21    3
邻苯二甲酸二己酯    335.3    149    20    DHXP 1    30    10    27    3
                   335.3    233.1    20    DHXP 2    30    10    12    3
邻苯二甲酸二（2-丁氧基）酯    367.3    101.1    20    DBEP 1    35    10    18    3
                           367.3    249.1    20    DBEP 2    35    10    12    3
邻苯二甲酸二环己酯    331.2    149.1    20    DCHP 1    30    10    36    3
                   331.2    167.1    20    DCHP 2    30    10    21    3
邻苯二甲酸二庚酯    363.2    149    20    DHP 1    35    10    22    3
                   363.2    247.1    20    DHP 2    35    10    13    3
邻苯二甲酸二（2-乙基）己酯    391.3    149    20    DEHP 1    35    10    25    3
                           391.3    167.1    20    DEHP 2    35    10    20    3
邻苯二甲酸二苯酯    319.1    225    20    D_P 1    30    10    16    3
                   319.1    77    20    D_P 2    30    10    54    3
邻苯二甲酸二正辛酯    391.3    149    20    DNOP 1    35    10    25    3
                   391.3    261.2    20    DNOP 2    35    10    13    3
邻苯二甲酸二异壬酯    419.3    149    20    DINP 1    38    10    54    3
                   419.3    127.2    20    DINP 2    38    10    18    3
邻苯二甲酸二异癸酯    447.2    141    20    DIDP 1    45    10    15    3
                   447.2    289.2    20    DIDP 2    45    10    15    3
CUR    CAD    IS    TEM    GS1    GS2
25    6    5500    650    65    65

3.3 溶液制备
3.3.1对照品溶液制备：
3.3.1.1邻苯二甲酸酯二壬酯(DNP)对照液：精密称取邻苯二甲酸酯二壬酯(DNP)对照品5mg，置于500ml容量瓶中，加入适量甲醇超声溶解，定容。精密量取1ml置于100ml容量瓶中，加入甲醇定容至刻度，摇匀，过0.45μm的滤膜，即得。
3.3.1.2邻苯二甲酸酯类混合对照液：精密量取邻苯二甲酸酯类混合对照品1ml，置于100ml容量瓶中，加入甲醇定容至刻度，摇匀，过0.45μm的滤膜，即得。
3.3.2供试品溶液制备：
3.3.2.1不含油脂固体或半固体试样
  取固体试样20粒（片）或10g（若试样为胶囊，应取内容物），研细，混合均匀。精密称取试样1.0g,置于50ml具塞比色管中，精密量取5ml乙腈，超声（功率500W，频率50kHz）处理至提取完全（约5min），取上清液，经0.45μm的滤膜过滤，即得。
3.3.2.2 含油脂试样
  精密称取混合均匀试样1.0g，置于25ml具塞磨口玻璃试管中，加入5ml乙腈，涡旋混合2min, 超声（功率500W，频率50kHz）处理至提取完全（约10min）,离心,收集上清液。重复提取一次，合并上清液。将提取液于40℃氮吹至干，精密量取1ml乙腈，超声（功率500W，频率50kHz）处理至提取完全（约1min），放入-18℃的冰箱冷藏2h，离心，取上清液，经0.45μm的滤膜过滤，即得。
3.4 测定
精密吸取对照品溶液进样量：2μL，4μL，6μL，8μL，10μL与供试品溶液进样量：10μl，注入液相质谱联用仪，建立标准曲线方程。供试品色谱中应呈现与对照品色谱峰保留时间相同的色谱峰定量。
3.5 结果计算
X=V×C×100/M
式中： X—试样中邻苯二甲酸酯类的含量，mg/100g；
C—试样溶液中邻苯二甲酸酯类的浓度，mg/mL；
M—试样的质量，g；                 
V—试样稀释的体积，mL。