解答:维生素主要分为水溶性维生素和脂溶性维生素两大类,基本都可以用液相色谱法检测,下面分别进行介绍。(1
)水溶性维生素的检测由于水溶性维生素(主要是B
族维生素和维生素C
)易溶于水,极性较强,很难直接在如C
18等反相柱上保留。因此该类物质分析一般有两种方式:一是用含NH
2等极性键合相的正相色谱柱,如图6-24
的HILLIC
模式;二是在反相色谱(如C
18、C
8等)流动相中添加离子对缓冲试剂(如Na
3PO
4、KH
2PO
4、己烷磺酸盐等)增加其保留时间,见图6-25
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图6-24 HILIC模式色谱柱分离水溶性维生素的色谱图
1—烟酰胺;2—维生素B7;3—维生素B6;4—维生素C;5—维生素B12;6—维生素B1
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图6-25 C18柱分离水溶性维生素色谱图
1—维生素B1;2—维生素C;3—烟酸;4—维生素B6;5—泛酸;6—叶酸;7—维生素B12;8—维生素B2
(2
)脂溶性维生素的HPLC
检测脂溶性维生素(维生素A
、D
、E
等)极性较弱,可以直接用C
18、C
8等反相色谱柱分离。需要注意的是,维生素E
(生育酚)共有α
、β
、γ
、δ
四种结构类型,C
18等反相柱很难将这四种完全分开,而硅胶、二醇基(Diol
)等正相柱能很好地分离这四种结构,见图6-26
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图6-26维生素E在二醇基色谱柱上的色谱图
1—α-维生素E;2—β-维生素E;3—γ-维生素E;4—δ-维生素E
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